發(fā)布時間：2017-12-03 15:34

  本文關鍵詞：Exendin-4對人臍靜脈內皮細胞內質網(wǎng)應激損傷的拮抗作用

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【摘要】：目的研究exendin-4(Ex-4)對人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)內質網(wǎng)應激相關凋亡的拮抗作用。方法 RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)HUVECs,待細胞長到培養(yǎng)瓶底部80%左右后,分4組干預細胞,每組8瓶,共32瓶。實驗分組:①正常對照組(n=8):不做任何處理;②Ex-4組(n=8):(Ex-4,8μg/mL,45 min);③EPBS組(n=8):(EPBS,100μL/mL,30 min);④雙藥組(n=8):Ex-4預處理(8μg/mL,45 min),后加EPBS(100μL/mL,30 min)。免疫熒光法檢測確認HUVECs上存在胰高血糖素樣肽-1受體(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R);內源性過氧化氫酶抑制物(endogenous peroxidase blocking solution;EPBS)誘導HUVECs的凋亡,流式細胞儀檢測細胞凋亡率變化;加入Ex-4預處理后,觀察EPBS誘導HUVECs凋亡率的變化。Western blot檢測細胞Calnexin、(C/EBP homologous protein,CHOP)和Bax表達情況,探討內質網(wǎng)應激相關凋亡的機制。結果①HUVECs上有GLP-1受體表達;②與正常對照組相比,EPBS組HUVECs的凋亡率顯著增加[(52.27±3.66)%vs(7.25±0.62)%,P0.01)];與EPBS組比較,Ex-4的預處理可明顯降低EPBS誘導的HUVECs凋亡[(37.77±2.86)%vs(52.27±3.66)%,P0.01)]。與正常對照組相比,EPBS能增加Calnexin[(1.76±0.16)vs(1.00±0.05),P0.01]、CHOP[(4.58±0.32)vs(1.00±0.12),P0.01]和Bax[(2.25±0.10)vs(1.00±0.06),P0.01]的表達;與EPBS組比較,Ex-4的預處理可顯著降低Calnexin[(0.42±0.05)vs(1.76±0.16),P0.01]、CHOP[(0.64±0.10)vs(1.65±0.12),P0.01]和Bax[(1.48±0.08)vs(2.25±0.10),P0.01)]的表達。結論 Ex-4對EPBS誘導的HUVECs凋亡有明顯抑制作用,其抑制作用可能與EX-4減少內質網(wǎng)應激相關蛋白Calnexin、CHOP和Bax相關。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心血管內科;
【分類號】：R363
【正文快照】： 內質網(wǎng)應激(ER Stress,ERS)可誘導多種細胞凋亡[1-2],內質網(wǎng)分子伴侶鈣聯(lián)蛋白(Calnexin,CLNX)在ERS的促凋亡效應中起重要作用[3-4]。C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)是一種內質網(wǎng)相關促凋亡蛋白,發(fā)揮轉錄因子的作用,參與調控生存、死亡相關基因的表達[5]。Bax是

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本文編號：1249196