人骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)方法的改良
發(fā)布時間:2017-12-02 18:00
本文關(guān)鍵詞:人骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)方法的改良
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【摘要】:目的改良人骨髓間充質(zhì)干細胞(HBMSCs)體外分離培養(yǎng)的方法。方法采用含體積比為10%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)體系,通過密度梯度離心和貼壁篩選法從人骨髓中分離培養(yǎng)貼壁細胞,流式檢測該細胞表面標志物,體外誘導成脂、成骨、成軟骨分化并鑒定該細胞的多項分化能力,集落克隆形成和MTT試驗檢測該細胞的活力和增殖能力,并分別與經(jīng)典的Dexter長期培養(yǎng)體系比較。結(jié)果采用改良方法從人骨髓中分離、培養(yǎng)出具有塑料底物粘附性的細胞,目的細胞不表達或低表達CD14、CD34、CD45,高表達CD73、CD90、CD105;體外成功誘導脂肪細胞、骨細胞、軟骨細胞分化;Dexter-LTC體系培養(yǎng)的集落個數(shù)(為8.0±1.0)個、單個集落細胞數(shù)為(59.2±8.2)個,改良法培養(yǎng)的集落個數(shù)為(11.3±1.53)個、單個集落中細胞數(shù)為(66.5±14.4)個(P0.05);在Dexter-LTC培養(yǎng)體系下,BMSCs于培養(yǎng)d10進入對數(shù)生長期、d19進入平臺期,改良法培養(yǎng)BMSCs d4進入對數(shù)生長期、d15進入平臺期。結(jié)論成功建立了改良的HBMSCs體外分離培養(yǎng)體系,且該方法培養(yǎng)的HBMSCs體外擴增速度、增殖能力、克隆形成能力明顯改善。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院輸血科;
【基金】:國家自然科學基金(81102080)
【分類號】:R329
【正文快照】: 人骨髓間充質(zhì)干細胞(human bone mesenchymalstem cells,HBMSCs)是1種具有自我更新和多向分化潛能的多能干細胞,在相應的誘導條件下能體外分化為骨、脂肪、軟骨、神經(jīng)、肝和心肌細胞等多種細胞組織[1~3],在放射病、血液病等臨床治療以及組織器官修復等方面具有極大的應用潛力
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
1 楊巖;陳曉;李薇;王冠軍;;低劑量輻射對人骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性的影響[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2008年01期
2 黃粵;戴麗冰;鐘曉e,
本文編號:1245751
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