本文關鍵詞：攜帶TGF-βⅡ型受體及NKG2D融合基因的NK-92細胞生物學特性研究

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【摘要】：目的構建攜帶TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜區(qū)及NKG2D胞內段融合基因的NK-92細胞,并檢測其生物學特性。方法通過RT-PCR從人外周血淋巴細胞中擴增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜區(qū)及NKG2D胞內段基因;利用PCR的方法將2段基因融合,并構建含有融合基因的慢病毒穿梭質粒;將該質粒與包裝質粒共轉染293T細胞,獲得慢病毒顆粒并感染NK-92細胞系,篩選出穩(wěn)定轉染的NK-92細胞系;采用流式細胞術檢測目的基因在轉染后的NK-92細胞系中的表達,用CCK-8的方法檢測24 h和48 h時NK-92-TN的存活能力,同時用Transwell的方法檢測NK-92-TN的遷移能力。結果測序表明,成功獲得了TGF-βRⅡ胞外段跨膜區(qū)與NKG2D胞內段的融合基因;獲得了重組慢病毒;通過篩選得到了可穩(wěn)定表達融合基因的NK-92細胞系,同時NK-92-TN的存活能力和遷移能力要明顯優(yōu)于對照組。結論成功建立表達TN的NK-92細胞系,并且發(fā)現(xiàn)NK-92-TN的存活能力和遷移能力明顯優(yōu)于對照組,從而為NK-92-TN細胞的體內生物學功能的研究工作奠定了基礎。
【作者單位】： 蘇州大學生物醫(yī)學研究院腫瘤與細胞分子免疫實驗室;
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 上世紀80年代相繼發(fā)現(xiàn)了TGF-β1、TGF-β2及TGF-β3[1],到目前為止,該家族成員又增加了TGF-β4、TGF-β5。該家族成員的受體主要有TGF-βreceptorⅠ,TGF-βreceptorⅡ和TGF-βreceptorⅢ3種類型。在炎癥及腫瘤發(fā)生的早期TGF-β主要抑制炎癥及腫瘤的發(fā)展,但是在腫瘤發(fā)生的晚期

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本文編號：1240817