本文關(guān)鍵詞：HBx誘導(dǎo)小鼠肝前體細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化

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【摘要】：目的探討乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)能否誘導(dǎo)肝前體細(xì)胞(HPCs)發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。方法將重組質(zhì)粒pSEB-Flag-HBX與包裝質(zhì)粒pAmpho共同轉(zhuǎn)染人胚胎腎上皮細(xì)胞系293T細(xì)胞,包裝獲得攜帶HBx基因的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒,并感染小鼠肝前體細(xì)胞HP14.5,經(jīng)稻瘟菌素(blasticidin)篩選,獲得穩(wěn)定表達(dá)HBx的HP14.5細(xì)胞。觀察其形態(tài)變化,通過實(shí)時定量PCR(real time-PCR)及Western blot法檢測其間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物和上皮標(biāo)志物在mRNA和蛋白水平的表達(dá)量,并采用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測其細(xì)胞遷移能力的變化。結(jié)果 HP14.5細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)HBx蛋白后細(xì)胞由多角形變?yōu)殚L梭形;與對照組相比,神經(jīng)鈣黏素(N-cadherin)、Snail、vimentin的mRNA和蛋白水平表達(dá)均升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)而上皮性鈣黏素(E-cadherin)、細(xì)胞角蛋白18(CK18)的mRNA和蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05;同時其遷移能力顯著升高(P0.05)。結(jié)論 HBx能誘導(dǎo)肝前體細(xì)胞發(fā)生EMT,并增強(qiáng)其遷移能力。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071770,81201679)
【分類號】：R329
【正文快照】： 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮細(xì)胞失去細(xì)胞頂-底極性轉(zhuǎn)化為間質(zhì)細(xì)胞的過程,表現(xiàn)為細(xì)胞上皮標(biāo)志物表達(dá)下調(diào),間質(zhì)標(biāo)志物表達(dá)升高,細(xì)胞獲得遷移和侵襲能力,相反過程為間質(zhì)-上皮轉(zhuǎn)化(mesenchymal-epithelial transition,MET)[1]。EMT/MET在肝臟

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