Importin 8在成骨分化中的細(xì)胞內(nèi)定位及表達(dá)差異
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【摘要】:目的觀察Importin 8(IPO8)在成骨分化過程中的細(xì)胞內(nèi)定位與表達(dá)差異。方法對人成骨樣SaOS-2細(xì)胞進(jìn)行成骨誘導(dǎo)分化,采用茜素紅染色、免疫細(xì)胞化學(xué)方法和實時定量PCR技術(shù)檢測成骨分化效果及分化過程中IPO8的細(xì)胞內(nèi)定位和表達(dá)差異。結(jié)果茜素紅染色顯示SaOS-2細(xì)胞成骨誘導(dǎo)第10天可見大量紅色結(jié)節(jié)樣結(jié)構(gòu)。免疫細(xì)胞化學(xué)方法顯示,IPO8主要定位于細(xì)胞核周胞質(zhì)。誘導(dǎo)至第3天,IPO8胞漿胞核均有表達(dá),但明顯開始向核內(nèi)移動。至第7天,核內(nèi)表達(dá)更明顯,而到第10天,細(xì)胞呈骨細(xì)胞樣,IPO8均勻分布于胞質(zhì)內(nèi)。實時定量PCR技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),OPN基因在SaOS-2細(xì)胞成骨分化過程中表達(dá)增加,而IPO8基因在成骨分化至第3天時表達(dá)最高,之后呈下降趨勢。結(jié)論 IPO8在成骨分化過程中的細(xì)胞內(nèi)定位與表達(dá)存在明顯差異,提示IPO8可能參與成骨細(xì)胞分化過程的調(diào)控。
【作者單位】: 澳門理工學(xué)院高等衛(wèi)生學(xué)校;九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院江西省系統(tǒng)生物醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【基金】:澳門理工學(xué)院科研項目(RP/ESS-02/2011)~~
【分類號】:R329
【正文快照】: Importin 8(IPO8)是1997年發(fā)現(xiàn)的核質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白importinβ家族成員[1]。Importinβ家族成員是一類真核生物中廣泛存在的核質(zhì)轉(zhuǎn)運受體蛋白,介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)大部分蛋白質(zhì)、RNA等生物大分子的核質(zhì)轉(zhuǎn)運過程。Importinβ家族成員可以通過C端結(jié)合底物或接頭蛋白,N端結(jié)合RanGTP,中間部位結(jié)
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