本文關(guān)鍵詞：組蛋白的制備及其對巨噬細(xì)胞的影響

  更多相關(guān)文章： 原核蛋白表達 組蛋白類 巨噬細(xì)胞

【摘要】：目的:用不同方法制備組蛋白并觀察組蛋白在體外對巨噬細(xì)胞活力及細(xì)胞因子釋放的影響。方法:用基因克隆的方法構(gòu)建組蛋白H3和H4的原核表達質(zhì)粒,分別表達和純化帶谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)和組氨酸(His)標(biāo)簽的組蛋白(GST-H3、GST-H4、His-H3和His-H4);用高鹽法提取真核細(xì)胞(RAW264.7和293F細(xì)胞)組蛋白;用上述不同來源組蛋白(7.5～50 mg/L)刺激巨噬細(xì)胞4 h,利用MTT和流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞活力;用液相芯片方法檢測不同來源組蛋白對巨噬細(xì)胞釋放在培養(yǎng)上清中的細(xì)胞因子白細(xì)胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的濃度。結(jié)果:His-H3/H4和真核細(xì)胞來源的組蛋白明顯降低細(xì)胞活性,誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞發(fā)生晚期凋亡和壞死;不同來源組蛋白對RAW264.7細(xì)胞釋放IL-6和TNF-α均有不同程度的促進作用。結(jié)論:原核表達His-H3、His-H4及真核細(xì)胞提取的組蛋白均可抑制巨噬細(xì)胞活力,誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞發(fā)生晚期凋亡和壞死。組蛋白可能通過促進炎癥細(xì)胞因子的釋放參與了炎癥反應(yīng)過程。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室 廣東省功能蛋白質(zhì)組學(xué)重點實驗室;
【基金】：國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃)項目(No.2010CB529704) 國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81272149;No.81072425)
【分類號】：R392
【正文快照】： 組蛋白(histone,H)是真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)蛋白。組蛋白分子量較小(約10～20 kD),富含帶正電荷的堿性氨基酸,能與DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基團相互作用,共同組成染色體的基本單位。因氨基酸的成分和分子量不同,組蛋白主要分為H1、H2A、H2B、H3和H4五種,其中,H2A、H2B、H3和H4

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 趙翠香;張麗娟;龍云;王鳳斌;;GST對轉(zhuǎn)染APP695基因PC12細(xì)胞形態(tài)和增殖能力的影響[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2011年04期

2 李明岳;余小舫;鮑世韻;林寶行;王春友;;小鼠不同細(xì)胞間表觀遺傳修飾的變化對Pdx-1基因轉(zhuǎn)錄表達的影響[J];中國病理生理雜志;2010年04期

3 劉靖華;李志杰;唐靖;劉亞偉;趙雷;鄧鵬;姜勇;;高遷移率族蛋白1誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞釋放細(xì)胞因子的作用及其與脂多糖對白細(xì)胞介素6釋放的協(xié)同效應(yīng)[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2006年17期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張英;李衛(wèi)東;遲春昕;;孕激素對高遷移率族蛋白B1誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素-6作用的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2008年12期

2 鐘田雨;唐靖;劉亞偉;李志杰;陳登宇;趙明哲;王蔚;劉靖華;姜勇;;絲裂原活化的蛋白激酶在高遷移率族蛋白1誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞釋放炎性細(xì)胞因子中的作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年08期

3 鄒琪;何先弟;;膿毒癥蛋白質(zhì)組學(xué)的研究進展[J];中華全科醫(yī)學(xué);2012年04期

4 曾平;符秀瓊;王啟瑞;范欽;賈鈺華;孫學(xué)剛;;加味補陽還五湯對動脈粥樣硬化斑塊形成及炎癥細(xì)胞因子表達譜的影響[J];中藥藥理與臨床;2009年06期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 謝曉勇;淺低溫心臟不停跳手術(shù)減輕術(shù)后肺損傷機制及對高遷移率族蛋白B1表達影響研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 蕭梅芳;肝細(xì)胞分泌的HMGB1蛋白的分離、純化、鑒定及對小鼠巨噬細(xì)胞的作用[D];中南大學(xué);2012年

3 曹滌非;流產(chǎn)布魯氏菌Omp25與L7/L12促巨噬細(xì)胞凋亡的分子機制[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 郭海雷;盲腸結(jié)扎穿孔膿毒癥大鼠早期血管內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞損傷及其相關(guān)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

2 徐巖;高遷移率族蛋白B1對牙周膜成纖維細(xì)胞影響的研究[D];山東大學(xué);2009年

3 鄒琪;鮑曼不動桿菌膿毒癥大鼠中性粒細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2012年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 吳旋,徐海偉,黎海蒂,趙邦云,熊加祥,曹娟;APP695和綠色熒光蛋白在PC12細(xì)胞中的共表達及對細(xì)胞的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2003年03期

2 張海寧;丘欽英;關(guān)永源;;反義ClC-3寡核苷酸對PC12細(xì)胞增殖的影響[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年04期

3 盧海燕;丁海霞;馮美江;董海蓉;高蓉;丁新生;肖杭;;BDNF RNA干擾在多巴胺能PC12細(xì)胞凋亡中的作用研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2009年13期

4 段艷;王冰;崔韶輝;趙不凋;姜云霞;楊穎;姜慧明;張樹彪;;陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞的實驗[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年11期

5 王錚;祝勇;;阿爾茨海默病的發(fā)病機制與藥物治療[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2007年11期

6 唐小龍;張洹;朱康兒;郭敏;;PDX1聯(lián)合NKX6.1促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為胰島β樣細(xì)胞[J];中國病理生理雜志;2009年08期

7 趙海峰 ,肖榮;Alzheimer氏病基因突變及病理改變的研究進展[J];中國公共衛(wèi)生;2002年07期

8 張麗娟;王鳳斌;成敏;劉蓉;;突變型人APP基因與增強型綠色熒光蛋白基因融合載體的構(gòu)建[J];中國老年學(xué)雜志;2009年21期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 修玉珍;;細(xì)胞性免疫的現(xiàn)狀和存在的問題[J];山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);1974年02期

2 吳觀陵;人瘧獲得性免疫的機制和抗體反應(yīng)的流行病學(xué)類型[J];國際醫(yī)學(xué)寄生蟲病雜志;1975年05期

3 趙玉驊;急性硬化性全腦炎病例(SSPE)時細(xì)胞免疫功能的研究[J];國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志;1976年04期

4 黃華j,王蘇生,鄭永木,李秀珍,尚芙蓉,王壯,陳艾,李延;巨噬細(xì)胞中與識別抗原有關(guān)的RNA合成及特性[J];遺傳學(xué)報;1981年01期

5 Dos Reis G A;葉天星;;風(fēng)濕性心臟病免疫致病機理的一種新的假說——依賴巨噬細(xì)胞對抗原決定基的選擇在導(dǎo)致鏈球菌風(fēng)濕性心臟炎誘生期中的作用[J];國際免疫學(xué)雜志;1981年05期

6 臧人杰;周光炎;;HLA抗原在免疫活性細(xì)胞相互作用中的生物功能[J];國際免疫學(xué)雜志;1982年01期

7 郭壽延;王寶美;趙雁飛;嚴(yán)忠馥;韓玉升;陳秀麗;辛梅珍;瞿祖康;朱建國;張蕙心;梁oO聲;柯玲;丁麗珍;;厭氧棒狀桿菌菌苗的免疫病理 Ⅲ、菌苗激活巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的作用[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;1982年01期

8 夏邦順;巨噬細(xì)胞Fc受體[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1983年04期

9 馮宗忱,SR Bates,GS Getz,RW Wissler;極低密度脂蛋白引起巨噬細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的堆積:脂蛋白受體的作用[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);1983年02期

10 顧紹裘;免疫反應(yīng)中免疫活性細(xì)胞間的關(guān)系[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1983年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 柴嬋娟;楊志明;康玉明;肖傳實;;核因子-κB信號途徑介導(dǎo)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

2 劉尚喜;;巨噬細(xì)胞參與泡沫細(xì)胞形成的機理[A];中華醫(yī)學(xué)會腎臟學(xué)分會2004年年會暨第二屆全國中青年腎臟病學(xué)術(shù)會議專題講座匯編[C];2004年

3 吳南屏;常秀春;姚航平;李丹;馮磊;;RANTES蛋白對SARS病毒感染巨噬細(xì)胞的抑制效應(yīng)及機制[A];2006年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

4 丁健;林琳;鄭彥;杭緯;顏曉梅;;鈹?shù)募?xì)胞攝入機制探討[A];中國化學(xué)會第26屆學(xué)術(shù)年會化學(xué)生物分會場論文集[C];2008年

5 劉星光;姚鳴;李楠;王春梅;鄭媛媛;曹雪濤;;鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ通過結(jié)合并活化TAK1和IRF3加強巨噬細(xì)胞中TLR配體誘導(dǎo)的炎癥因子和Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

6 王家鑫;;小鼠接種布魯氏菌疫苗引起的巨噬細(xì)胞依賴性樹突狀細(xì)胞遷移與免疫應(yīng)答[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

7 周南進;謝勇;黃慶倫;劉東升;;SIGIRR對巨噬細(xì)胞LPS/TLR信號通路的影響[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

8 呂建新;金麗琴;俞康;袁謙;謝克儉;;多糖對人胸腔巨噬細(xì)胞激活作用的研究[A];面向21世紀(jì)的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

9 林靜;李大主;;CD4~+ CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對于巨噬細(xì)胞泡沫化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

10 陳旭林;郭峰;王飛;王永杰;;不同濃度的AngⅡ?qū)AW264.7巨噬細(xì)胞AT1受體表達的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會燒傷外科學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 侯嘉 何新鄉(xiāng);硒的神奇功能[N];中國食品質(zhì)量報;2003年

2 本報記者 楊珂;了解我們的體內(nèi)“衛(wèi)士”——免疫系統(tǒng)[N];中國消費者報;2001年

3 劉永銘;T淋巴細(xì)胞加重動脈粥樣硬化[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

4 錢錚;日本 發(fā)現(xiàn)感知組織損傷并引發(fā)炎癥的受體[N];大眾科技報;2008年

5 蔣明;戴勁松;武大傷寒桿菌致病機制研究獲成果[N];中國醫(yī)藥報;2004年

6 知陶;把炎癥反應(yīng)排除在外[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

7 莊愉;新型抗結(jié)核疫苗的開發(fā)研究[N];中國醫(yī)藥報;2002年

8 聞玉;天然胡蘿卜素的免疫調(diào)節(jié)功能[N];中國醫(yī)藥報;2003年

9 王振坤;人體血液防線之五[N];家庭醫(yī)生報;2007年

10 通訊員　 湯宏 記者　 唐先武;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)抗病毒免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)新機制[N];科技日報;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王玉珍;溶酶體相關(guān)的小G蛋白Rab7b負(fù)向調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞Toll樣受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究[D];浙江大學(xué);2006年

2 馬翠卿;GAS下調(diào)巨噬細(xì)胞炎癥因子的作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

3 張偉;Krǔppel-like factor家族成員KllfO對巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子的調(diào)控研究[D];浙江大學(xué);2012年

4 周江睿;神經(jīng)肽Y對巨噬細(xì)胞炎性因子和小分子炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)及機制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

5 羅沖;重癥聯(lián)合免疫缺陷小鼠內(nèi)毒素血癥巨噬細(xì)胞的生物學(xué)特性[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

6 趙雁;microRNAs在α-黑素細(xì)胞刺激素抑制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子-α中的作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

7 徐靜瑋;日本血吸蟲抗原誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化的分子證據(jù)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

8 劉輝;LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞珠高、低反應(yīng)并存及其機制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

9 楊策;PPARγ基因沉默對細(xì)胞炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 郭東星;睪酮通過細(xì)胞膜雄激素受體影響骨髓巨噬細(xì)胞中Notch受體及配體的表達[D];四川大學(xué);2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 龍飛;糖皮質(zhì)激素對巨噬細(xì)胞快速非基因組作用的研究[D];青島大學(xué);2005年

2 李永軍;糖基化終產(chǎn)物對巨噬細(xì)胞MMP-9表達與活性的影響及其機制的初步研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

3 郭俊杰;雙歧桿菌細(xì)胞壁的免疫調(diào)節(jié)和抑瘤作用研究[D];安徽理工大學(xué);2006年

4 張小磊;巨噬細(xì)胞甘露糖受體siRNA體系的建立及對殼寡糖與巨噬細(xì)胞結(jié)合的影響[D];浙江大學(xué);2007年

5 朱珊;熱休克預(yù)處理及HSF1對LPS所致巨噬細(xì)胞遷移及黏附的影響研究[D];中南大學(xué);2009年

6 張建斌;氯化鈷和脂多糖對巨噬細(xì)胞RAW264.7表達HIF-1α和TGF-β1的影響[D];蘇州大學(xué);2010年

7 王寧飛;Rab7負(fù)向調(diào)控巨噬細(xì)胞中TLR3/4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

8 康耀霞;差異顯示法分析雌二醇對巨噬細(xì)胞基因表達的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2002年

9 劉鴻程;異種胸腺修飾對巨噬細(xì)胞功能影響的研究[D];蘇州大學(xué);2004年

10 夏長勝;結(jié)核分枝桿菌H37Ra和卡介苗感染小鼠及巨噬細(xì)胞的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

，

本文編號：1234259