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炭疽芽孢桿菌A16R株lysA基因缺失突變株的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2017-11-25 22:17

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【摘要】:目的構(gòu)建炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis)A16R株lysA基因缺失突變株,為后續(xù)的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。方法以炭疽桿菌活疫苗A16R株lysA基因?yàn)槟康娜笔Щ?利用軟件設(shè)計(jì)上下游同源臂以及抗性基因的引物,用同源重組酶將3個(gè)片段連入質(zhì)粒中,構(gòu)建重組質(zhì)粒,并將重組質(zhì)粒導(dǎo)入炭疽桿菌A16R感受態(tài)細(xì)胞中,篩選炭疽桿菌A16R株lysA基因缺失突變株,對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。最后繪制缺失突變株和野生株生長(zhǎng)曲線并進(jìn)行生理生化分析。結(jié)果成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒,經(jīng)同源重組后獲得lysA基因缺失突變株。鑒定表明目的基因已經(jīng)丟失。結(jié)論成功獲得炭疽桿菌A16R株lysA基因缺失突變株,為定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究奠定了基礎(chǔ),也為炭疽桿菌重要基因功能的研究建立了良好的技術(shù)平臺(tái)。
【作者單位】: 江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所病原微生物生物安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81071322) 國(guó)家科技重大專項(xiàng)資助項(xiàng)目(2012ZX10004215)
【分類號(hào)】:R378
【正文快照】: 炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis),簡(jiǎn)稱炭疽桿菌,無鞭毛,有莢膜,屬革蘭陽性菌。炭疽是由炭疽桿菌引起的人畜共患病,危害性極強(qiáng),對(duì)世界各地的人類健康及畜牧業(yè)都構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。炭疽桿菌的芽孢接觸到皮膚傷口、消化道或呼吸道上皮后,引起感染并導(dǎo)致皮膚炭疽、肺炭疽、腸道炭

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉偉;賀福初;姜穎;;蛋白質(zhì)組體內(nèi)標(biāo)記技術(shù)——SILAC技術(shù)[J];生命的化學(xué);2009年03期

2 高美琴;劉先凱;馮爾玲;唐恒明;朱力;陳福生;王恒j;;炭疽芽孢桿菌A16R株eag基因缺失突變株構(gòu)建[J];微生物學(xué)報(bào);2009年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李月s,

本文編號(hào):1227589


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