OCT4腺病毒真核表達載體的構(gòu)建及對心肌再生的作用
發(fā)布時間:2017-11-23 07:25
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【摘要】:目的:構(gòu)建八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)腺病毒真核表達載體pAV.Ex1d.-CMVmOCT4/IRES/eGFP,探討OCT4腺病毒載體對大鼠心肌再生的作用。 方法:利用Gateway技術(shù)構(gòu)建pAV.Ex1d.-CMVmOCT4/IRES/eGFP載體,腺病毒包裝后,用微量進樣器直接注射到大鼠心肌,利用RT-PCR、免疫熒光分別檢測心肌組織中OCT4的表達,HE染色檢測OCT4表達后心肌組織是否正常。構(gòu)建大鼠心梗模型,HE染色鑒定,在梗死區(qū)周圍直接注射OCT4腺病毒載體,,4周后Western檢測心肌梗死區(qū)肌鈣蛋白的表達。 結(jié)果:免疫熒光法檢測到外源性O(shè)CT4在心肌細胞核中表達呈紅色熒光,RT-PCR在OCT4腺病毒組中可檢測到OCT4的表達,而空病毒組與對照組則檢測不到,HE染色結(jié)果表明OCT4在活體心肌表達后心肌組織形態(tài)正常,心肌梗死區(qū)周圍注射OCT4腺病毒載體4周后肌鈣蛋白在OCT4組的表達量與對照組、空病毒組比較有明顯差異(P0.05)。 結(jié)論:外源OCT4可在活體心肌中表達,能促進梗死區(qū)心肌的再生。
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R542.22
【參考文獻】
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1 汪進良;焦順昌;;重組人p53腺病毒治療腫瘤臨床研究進展[J];中國實用醫(yī)藥;2008年01期
本文編號:1217682
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