自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤對肝星狀細胞增殖活化的影響
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【摘要】:目的觀察自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)對大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)增殖活化的影響,并探討其作用機制。方法體外培養(yǎng)大鼠肝星狀細胞株HSC-T6,設(shè)立空白對照組和3-MA低劑量組(2.5 mmol/L)、中劑量組(5 mmol/L)、高劑量組(10 mmol/L)。RT-PCR分析不同濃度3-MA對HSC活化標志蛋白α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)以及Ⅰ型膠原蛋白基因表達的影響,Western blot法檢測不同濃度3-MA對HSC中自噬水平標志蛋白LC3Ⅱ、α-SMA以及Ⅰ型膠原蛋白表達水平的影響;MTT法檢測3-MA對HSC增殖的影響,流式細胞術(shù)分析3-MA對HSC細胞周期的影響。結(jié)果低、中、高劑量3-MA作用于HSC后,HSC-T6細胞自噬水平隨3-MA濃度升高逐漸下降,α-SMA、Ⅰ型膠原蛋白mRNA相對表達量均明顯低于對照組(P0.05),LC3Ⅱ、α-SMA以及Ⅰ型膠原蛋白相對表達量均明顯低于對照組(P0.05)。與對照組相比,低、中、高劑量時3-MA對HSC增殖的影響均顯著下降(P0.05),G2期比例與對照組比較均明顯增加(P0.05)。結(jié)論 3-MA可下調(diào)大鼠HSC-T6細胞LC3Ⅱ的表達,抑制α-SMA及Ⅰ型膠原蛋白mRNA及蛋白的表達,使HSC-T6細胞周期停滯于G2期,抑制HSC增殖活化。
【作者單位】: 南昌大學第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科
【基金】:國家自然科學基金(30360037)
【分類號】:R392.12
【正文快照】: 肝星狀細胞(hepatic stellate cell,HSC)位于肝內(nèi)Disse間隙,富含維生素A和脂滴,又稱儲脂細胞,為肝間質(zhì)細胞之一。在各種致病因素(包括炎癥、腫瘤、氧化應激、毒物等)刺激下,HSC增殖活化,脂滴消失,表型向肌纖維母細胞轉(zhuǎn)化,表達其活化標志蛋白α-平滑肌肌動蛋白(a-smoothmusclea
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本文編號:1213676
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