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3株嗜吞噬細(xì)胞無形體AnkA蛋白原核表達(dá)及免疫原性差異性研究

發(fā)布時(shí)間:2017-11-21 04:18

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【摘要】:目的研究分析3株嗜吞噬細(xì)胞無形體AnkA蛋白的免疫原性。方法利用原核表達(dá)PCR擴(kuò)增了嗜吞噬細(xì)胞無形體Webster株,斯洛文尼亞1 567株,美國96HE58株ankA基因部分序列,構(gòu)建pET-30a-AnkA表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21中,以IPTG誘導(dǎo)高效表達(dá)融合蛋白,經(jīng)飛行質(zhì)譜鑒定氨基酸序列,免疫BALB/c小鼠制備多克隆抗體。Western blot分析3株菌AnkA重組蛋白與免疫小鼠血清抗體相互間的免疫反應(yīng)以及交叉反應(yīng)性。同時(shí)檢測3株菌AnkA重組蛋白與我國無形體病人血清抗體反應(yīng)性。結(jié)果表達(dá)的重組蛋白主要以可溶性形式存在,小鼠免疫獲得高效價(jià)抗AnkA IgG抗體,3株菌重組蛋白免疫抗體間存在免疫交叉。3株菌重組蛋白與我國無形體病人血清抗體存在免疫反應(yīng)。結(jié)論成功原核表達(dá)并純化了3株嗜吞噬細(xì)胞無形體AnkA蛋白,重組蛋白與我國無形體病人陽性血清存在免疫反應(yīng)。3株嗜吞噬細(xì)胞無形體AnkA重組蛋白與免疫小鼠多克隆抗體間存在交叉反應(yīng)。
【作者單位】: 新疆石河子大學(xué);中國疾病預(yù)防控制中心傳染病所無形體室;
【基金】:國家973計(jì)劃(No.2010CB530206) 十二五傳染病重大專項(xiàng)課題-重大傳染病應(yīng)急處置檢測技術(shù)平臺(No.2011ZX10004-001)聯(lián)合資助~~
【分類號】:R392.1
【正文快照】: Prokaryotic expression and immunogenicity of recombinantAnkA protein from 3 AnaplasmaphagocytophilumisolatesYAO Na1,2,CHEN Chuang-fu1,YU Qiang1,2,ZHANG Li-juan2(1.College of Animal ScienceTechnology,Shihezi University,Shihezi 832003,China;2.Department o

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本文編號:1209657

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