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一種改良的新生大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)方法

發(fā)布時間:2017-11-20 06:25

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【摘要】:目的:改良現(xiàn)有的小膠質(zhì)細(xì)胞純化分離培養(yǎng)方法,建立穩(wěn)定、高產(chǎn)的培養(yǎng)模型。方法:選用新生1~2d SD大鼠進行混合膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng),然后結(jié)合營養(yǎng)剝離法及震搖法純化分離小膠質(zhì)細(xì)胞;利用CD11b/c(OX42)免疫細(xì)胞化學(xué)的方法對分離的小膠質(zhì)細(xì)胞純度進行鑒定。結(jié)果:改良的方法可穩(wěn)定的獲得5×104個/培養(yǎng)瓶(25cm2)的小膠質(zhì)細(xì)胞,純度達到95%,熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),分離第1 d小膠質(zhì)細(xì)胞呈不規(guī)則圓形,折光不均勻,繼續(xù)培養(yǎng)3-5 d,小膠質(zhì)細(xì)胞逐漸出現(xiàn)單極或多極突起,7 d時部分細(xì)胞轉(zhuǎn)為靜止?fàn)顟B(tài),呈分枝狀。結(jié)論:改良的小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法產(chǎn)量多,純度高,為小膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)研究提供了新的基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院兒科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81171226)
【分類號】:R-332
【正文快照】: 作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫吞噬細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞不僅參與了腦梗塞、神經(jīng)退行性病變,與中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病、脫髓鞘及癲癇發(fā)病也密切相關(guān)[1-3]。為了進一步研究小膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性及參與各種損傷疾病的機制,建立一種體外原代培養(yǎng)小膠質(zhì)細(xì)胞的可行方式非常重要。由于小膠

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1 劉煜,宿長軍,段麗,曹榮,饒志仁;大鼠胃內(nèi)傷害性刺激后延髓內(nèi)臟帶中Fos蛋白及OX_(42)的免疫組織化學(xué)觀察[J];解剖學(xué)報;2005年03期

2 羅曉光;任艷;葛春林;吳哲;禹紅梅;周進;閆榮;張朝東;王秋爽;;活化小膠質(zhì)細(xì)胞對PC12細(xì)胞中CREB激活程度影響的研究[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2007年11期

3 羅曉光;葛春林;任艷;吳哲;王秋爽;董理;張朝東;;LPS激活的小膠質(zhì)細(xì)胞提高損傷PC12存活率[J];免疫學(xué)雜志;2008年02期

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3 李捷;劉勇;張蓬勃;肖新莉;呂海俠;李敏杰;康前雁;鄧美英;;大鼠局灶性腦缺血后小膠質(zhì)細(xì)胞的來源[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

4 吳軍;閔U,

本文編號:1206410


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