不同參數(shù)滾壓模式對兔BMSCs向軟骨細胞分化促進作用的研究
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【摘要】:目的觀察在不同滾壓參數(shù)下,滾壓載荷生物反應(yīng)器對BMSCs-瓊脂糖復合體中兔BMSCs向軟骨細胞誘導分化的作用。方法分離2.5月齡新西蘭兔BMSCs,培養(yǎng)至第3代后與低熔點瓊脂糖復合成凝膠塊,并在自制模具中形成直徑4 mm、高4 mm的圓柱形BMSCs-瓊脂糖復合體。將樣本分別在0.4 Hz、3 h/d基本參數(shù)下比較壓縮量10%、20%、30%(分別為A1、A2、A3組),以及0.4 Hz、20%壓縮量基本參數(shù)下比較20 min、3 h、12 h滾壓時間(分別為B1、B2、B3組)對BMSCs向軟骨細胞分化的作用,以靜態(tài)培養(yǎng)作為對照組。在培養(yǎng)24 h及7、14、21 d時取各組標本進行死活細胞檢測、實時定量PCR檢測、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量檢測及組織學染色觀察。結(jié)果死活細胞檢測:14、21 d時,A1、A2組活細胞比率均顯著高于A3組,B1、B2組活細胞比率均顯著高于B3組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。實時定量PCR檢測:各實驗組7、14、21 dⅡ型膠原及蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表達均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);14、21 d時,A1、A2組Ⅱ型膠原、Aggrecan mRNA表達均高于A3組,B1、B2組均高于B3組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。以上指標A1、A2組間及B1、B2組間比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。GAG含量檢測:14、21 d時,A1、A2組GAG含量均顯著高于對照組和A3組,B1、B2組GAG含量也顯著高于對照組和B3組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);21 d時A1、A2組間差異均有統(tǒng)計學意義(t=2.830,P=0.027)。組織學觀察:21 d時,A2組和B2組出現(xiàn)明顯藍染,可見軟骨陷窩樣結(jié)構(gòu);而A1、A3組和B1、B3組藍染效果較差,分布稀少。結(jié)論滾壓載荷生物反應(yīng)器在0.4 Hz、20%壓縮量、3 h滾壓時間參數(shù)下,能更有效地促進BMSCs-瓊脂糖復合體中兔BMSCs向軟骨細胞誘導分化。
【作者單位】: 武警后勤學院附屬醫(yī)院骨科;天津理工大學機械工程學院;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(11072087、11172208) 天津市自然科學基金資助項目(09JCYBJC1400)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 由于關(guān)節(jié)軟骨缺乏血管和神經(jīng)分布,關(guān)節(jié)軟骨損傷后的再生能力很弱,至今臨床上未能完全修復受損的關(guān)節(jié)軟骨[1]。BMSCs來源于骨髓,它具有多向分化潛能,在一定的局部力學及生化環(huán)境下可以分化為軟骨細胞、成骨細胞等[2]。BMSCs同時具有易獲得的特性,成為軟骨組織工程研究的熱點種
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,本文編號:1203230
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