本文關(guān)鍵詞：Notch信號通路對肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化中α-SMA表達(dá)變化的影響

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【摘要】：目的探討γ-分泌酶抑制劑DAPT抑制Notch信號后,肌成纖維細(xì)胞標(biāo)志因子α-SMA表達(dá)的變化,及Notch信號在肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化中的作用。方法采用胰酶消化法,從新出生2-3 d的SD大鼠肺組織中分離肺成纖維細(xì)胞,波形蛋白(Vimentin)免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定培養(yǎng)至第3代的成纖維細(xì)胞的純度,再將細(xì)胞分為對照組、TGF-β1組、TGF-β1+DAPT組;TGF-β1組及TGF-β1+DAPT組加入5 ng/mL的TGF-β1誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞,TGF-β1+DAPT組同時加入500 nmol/L的DAPT抑制Notch信號的表達(dá);分別采用RT-PCR法檢測α-SMA的mRNA表達(dá)變化,Western-blot法檢測α-SMA蛋白的表達(dá)變化;采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),多個樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。結(jié)果 Vimentin免疫細(xì)胞化學(xué):幾乎100%細(xì)胞胞漿內(nèi)可見棕黃色顆粒及條紋;TGF-β1組α-SMA的mRNA和蛋白的相對吸光度值分別為(0.8510.027)和(0.7850.020),均較對照組(0.3950.018)和(0.3910.022)明顯升高;TGF-β1+DAPT組的mRNA和蛋白的相對吸光度值分別為(0.3540.029)和(0.3970.016),均較TGF-β1組顯著下降,但與對照組比較無明顯差異。結(jié)論 TGF-β1可以誘導(dǎo)肺成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞,DAPT可以阻止成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,進(jìn)而抑制肺纖維化。
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】：江西省衛(wèi)生廳資助項(xiàng)目(No:20123071)
【分類號】：R363
【正文快照】： 肺纖維化是肺組織受到損傷后,人體自身修復(fù)的結(jié)果,其主要病理生理是細(xì)胞外基質(zhì)(extra cellu-lar matrix,ECM)的過度沉積,成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化在其中發(fā)揮著重要作用[1]。肌成纖維細(xì)胞可以合成分泌大量的ECM和促纖維化細(xì)胞因子,其持續(xù)存在可導(dǎo)致纖維化進(jìn)行性發(fā)展。

【相似文獻(xiàn)】

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1 楊s，

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