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布魯氏菌部分毒力相關調控因子免疫原性檢測與保護性評價

發(fā)布時間:2017-11-11 22:32

  本文關鍵詞:布魯氏菌部分毒力相關調控因子免疫原性檢測與保護性評價


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【摘要】:目的檢測部分布魯氏菌毒力相關調控因子刺激機體產生細胞免疫反應的能力,并對具有細胞免疫原性蛋白的免疫保護性進行初步評價。方法利用Gateway的方法將9個布魯氏菌毒力相關轉錄調控因子克隆至表達載體pHXGWA上并利用Ni-NAT層析的方法純化重組蛋白。構建布魯氏菌疫苗株S19株免疫的BALB/c小鼠模型,免疫35d后分離小鼠脾細胞并用體外重組蛋白再刺激,ELISA方法檢測蛋白體再刺激后小鼠脾細胞分泌的細胞因子IFN-γ水平,了解毒力相關調控因子刺激機體產生細胞免疫反應情況。以CpG-ODN為免疫佐劑,用具有細胞免疫活性蛋白免疫小鼠,觀察對布魯氏菌強毒株544攻擊感染的免疫保護作用。結果 7個布魯氏菌毒力相關調控因子在大腸埃希菌中得以表達。其中BMEⅠ1573及BMEⅡ0475再刺激下S19免疫小鼠脾細胞產生的IFN-γ水平高于PBS對照小鼠。而在以CpG-ODN為免疫佐劑時,兩者均不具有免疫保護性。結論布魯氏菌LysR家族及GntR家族的轉錄因子BMEⅠ1573及BMEⅡ0475具有細胞免疫原性,初步檢測無免疫保護作用。
【作者單位】: 湖北醫(yī)藥學院附屬人民醫(yī)院感染性疾病科;湖北醫(yī)藥學院微生物教研室;
【基金】:湖北省衛(wèi)生廳青年科技人才項目(No.QJX2010-24) 湖北省教育廳重點項目(No.D20122407)
【分類號】:R392
【正文快照】: 布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的能夠在人和動物中傳播的一類人獸共患病,近幾年發(fā)病人數有所增加[1,2]。亞單位疫苗是布魯氏菌疫苗研究的一個重要方向。布魯氏菌為胞內寄生菌,細菌侵入機體后能夠進入單核巨噬細胞系并在其吞噬溶酶體里繁殖。因此像許多其他胞內菌一樣,細胞介導的

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本文編號:1173193

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