調(diào)控Notch信號通路對胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響
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更多相關(guān)文章: 心肌細(xì)胞 胚胎干細(xì)胞 Jagged蛋白 MW Notch
【摘要】:目的:觀察Notch信號通路調(diào)控對胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響。方法:實(shí)驗(yàn)分為兩部分:調(diào)控Notch信號通路開關(guān),研究其對胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化比例的影響及心肌分化相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。在小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,加入Notch信號激活劑Jagged蛋白(5mg/L)或Notch信號抑制劑MW167(100μmol/L)作用14d,檢測:①自發(fā)性節(jié)律收縮細(xì)胞的出現(xiàn)情況;②心肌特異性收縮蛋白的表達(dá)情況,計(jì)算胚胎干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞的比例;③采用Westernblot方法檢測胚胎干細(xì)胞源性心肌細(xì)胞中心肌分化相關(guān)蛋白(Nkx2.5、GA-TA4、Tbx5、Myocardin)的表達(dá)。結(jié)果:與對照組(胚胎干細(xì)胞自發(fā)分化組)相比,加入Jagged蛋白后,胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的比例和早期心肌分化相關(guān)蛋白表達(dá)水平均顯著減少;而加入MW167后,分化比例及早期心肌分化相關(guān)蛋白均顯著增加。結(jié)論:胚胎干細(xì)胞中加入Jagged蛋白持續(xù)激活Notch信號,抑制了胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化;而加入MW167持續(xù)抑制Notch信號,則促進(jìn)了胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化。
【作者單位】: 武漢大學(xué)人民醫(yī)院心內(nèi)科;武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:30700314) 武漢市晨光計(jì)劃資助項(xiàng)目(編號:20065004116-02)
【分類號】:R329
【正文快照】: 近年來,通過移植胚胎干細(xì)胞再生心肌來治療心血管疾病已經(jīng)具有一定的理論基礎(chǔ),并開始顯露出廣闊的應(yīng)用前景[1,2]。然而,在其應(yīng)用于臨床前,迫切需要進(jìn)一步研究解決的問題是[3,4]:明確胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞定向分化的調(diào)控因素與機(jī)制,以提高胚胎干細(xì)胞源性心肌細(xì)胞的產(chǎn)量。采用
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