本文關(guān)鍵詞：不同標(biāo)記方法對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記的研究

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【摘要】：目的觀察Hoechest33342、BrdU、DAPI對大鼠BMSCs標(biāo)記情況,比較其標(biāo)記效果的差異性;培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因綠色熒光小鼠的BMSCs,觀察細(xì)胞生長情況和其熒光持續(xù)時(shí)間,比較其與熒光標(biāo)記后的干細(xì)胞之間的優(yōu)越性。方法貼壁篩選提取大鼠BMSCs,培養(yǎng)至第三代,流式細(xì)胞儀檢測其表面抗原,成骨、成脂誘導(dǎo)后染色;Hoechest33342、BrdU、DAPI標(biāo)記大鼠BMSCs,檢測標(biāo)記后的大鼠BMSCs增殖率,顯微鏡下觀察其熒光持續(xù)時(shí)間;觀察轉(zhuǎn)基因綠色熒光小鼠BMSCs在培養(yǎng)的不同時(shí)間段的細(xì)胞形態(tài)、熒光持續(xù)時(shí)間以及同上邊3種標(biāo)記方法比較的優(yōu)缺點(diǎn)。結(jié)果 Hoechest33342、BrdU、DAPI可用于對BMSCs的標(biāo)記;BrdU標(biāo)記過程較長,在前期不存在熒光猝滅缺點(diǎn),標(biāo)記后經(jīng)過熒光免疫組化處理后可見陽性細(xì)胞,Hoechest33342、DAPI標(biāo)記過程較短,熒光持續(xù)時(shí)間較長,但此過程中必須避光,對操作帶來了一定的困難。3種方法標(biāo)記后對細(xì)胞增殖率無影響;轉(zhuǎn)基因小鼠BMSCs生長較大鼠干細(xì)胞生長較慢,其優(yōu)點(diǎn)是不用標(biāo)記且熒光持續(xù)時(shí)間較長,用于細(xì)胞追蹤研究更為方便可行。結(jié)論干細(xì)胞有多向分化的潛能,因此有很好的研究價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值,對干細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,為干細(xì)胞遷移、歸巢機(jī)制的研究提供更好的研究平臺(tái)。
【作者單位】： 甘肅省中醫(yī)院;甘肅中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;甘肅中醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然基金項(xiàng)目(81060299)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是一類來源于中胚層的未分化間充質(zhì)干細(xì)胞,在體內(nèi)外均具有多向分化潛能和較強(qiáng)的增殖能力[1,2],是組織工程的首選種子細(xì)胞,也是移植領(lǐng)域應(yīng)用前景廣闊的再生來源細(xì)胞[3,10]。對于BMSCs標(biāo)記的研究,是目前研究干細(xì)胞遷

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 衣蕾;吉海旺教授治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2012年

3 張長海;雷公藤甲素對HCN4基因修飾大鼠MSCs同種異體心臟移植后細(xì)胞存活影響的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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4 馮科;淫羊藿苷在大鼠體內(nèi)促使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向睪丸類間質(zhì)細(xì)胞分化的研究[D];鄭州大學(xué);2012年

5 汪甜;柚皮苷在促M(fèi)SCs骨向分化過程中對MAPK信號(hào)通路的影響[D];暨南大學(xué);2012年

6 檀家俊;白介素1受體拮抗劑納米緩釋顆粒聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療豬急性肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京大學(xué);2012年

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10 陳麗;生脈注射液對SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)多種造血相關(guān)因子的干預(yù)研究[D];陜西中醫(yī)學(xué)院;2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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2 何偉;李自力;崔元璐;伊彪;梁成;王曉霞;李陽;王興;;淫羊藿苷對大鼠成骨細(xì)胞核結(jié)合因子α1、骨形成蛋白-2、骨形成蛋白-4 mRNA表達(dá)的影響[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年06期

3 王愛東;黃強(qiáng);董軍;季曉燕;蘭青;;腦腫瘤干細(xì)胞體外分化過程中的回逆現(xiàn)象分析[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2007年09期

4 楊軍;楊琴;承歐梅;賈延R，

本文編號(hào)：1165008