本文關鍵詞：不同標記方法對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞標記的研究

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【摘要】：目的觀察Hoechest33342、BrdU、DAPI對大鼠BMSCs標記情況,比較其標記效果的差異性;培養(yǎng)轉基因綠色熒光小鼠的BMSCs,觀察細胞生長情況和其熒光持續(xù)時間,比較其與熒光標記后的干細胞之間的優(yōu)越性。方法貼壁篩選提取大鼠BMSCs,培養(yǎng)至第三代,流式細胞儀檢測其表面抗原,成骨、成脂誘導后染色;Hoechest33342、BrdU、DAPI標記大鼠BMSCs,檢測標記后的大鼠BMSCs增殖率,顯微鏡下觀察其熒光持續(xù)時間;觀察轉基因綠色熒光小鼠BMSCs在培養(yǎng)的不同時間段的細胞形態(tài)、熒光持續(xù)時間以及同上邊3種標記方法比較的優(yōu)缺點。結果 Hoechest33342、BrdU、DAPI可用于對BMSCs的標記;BrdU標記過程較長,在前期不存在熒光猝滅缺點,標記后經(jīng)過熒光免疫組化處理后可見陽性細胞,Hoechest33342、DAPI標記過程較短,熒光持續(xù)時間較長,但此過程中必須避光,對操作帶來了一定的困難。3種方法標記后對細胞增殖率無影響;轉基因小鼠BMSCs生長較大鼠干細胞生長較慢,其優(yōu)點是不用標記且熒光持續(xù)時間較長,用于細胞追蹤研究更為方便可行。結論干細胞有多向分化的潛能,因此有很好的研究價值和應用價值,對干細胞進行標記,為干細胞遷移、歸巢機制的研究提供更好的研究平臺。
【作者單位】： 甘肅省中醫(yī)院;甘肅中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院;甘肅中醫(yī)學院;
【基金】：國家自然基金項目(81060299)
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是一類來源于中胚層的未分化間充質(zhì)干細胞,在體內(nèi)外均具有多向分化潛能和較強的增殖能力[1,2],是組織工程的首選種子細胞,也是移植領域應用前景廣闊的再生來源細胞[3,10]。對于BMSCs標記的研究,是目前研究干細胞遷

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本文編號：1165008