發(fā)布時(shí)間：2017-11-08 21:40

  本文關(guān)鍵詞：擬胚體高密度培養(yǎng)促進(jìn)小鼠胚胎干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化

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【摘要】：目的探討擬胚體(EBs)培養(yǎng)密度對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞(ESCs)心肌細(xì)胞分化的影響。方法小鼠ESCs經(jīng)過懸滴培養(yǎng)后形成EBs后,以高、低密度(120、60個(gè)EBs/60mm組織培養(yǎng)皿)貼壁培養(yǎng),免疫熒光檢測(cè)心肌特異性蛋白肌鈣蛋白T(TnT)的表達(dá)。在不同時(shí)間點(diǎn)計(jì)算不同密度組搏動(dòng)EBs百分比;RT-PCR檢測(cè)Nkx2.5、GATA4、β-MHC及ANF基因表達(dá)水平;Western-blot檢測(cè)TnT及p38表達(dá)水平。結(jié)果通過懸滴培養(yǎng)法形成的EBs能夠出現(xiàn)自發(fā)性搏動(dòng)并且有TnT表達(dá)。高密度培養(yǎng)組與低密度培養(yǎng)組相比具有更高的搏動(dòng)EBs百分比,Nkx2.5、GATA4、β-MHC和ANF基因高表達(dá)水平,以及TnT蛋白高表達(dá)水平(P0.05)。高密度培養(yǎng)組的p38活性更高,使用p38特異性阻斷劑SB203580能夠降低高密度組搏動(dòng)EBs百分比和TnT蛋白表達(dá)水平。結(jié)論 EBs貼壁培養(yǎng)密度是影響ESCs向心肌細(xì)胞分化的一個(gè)重要因素,EBs高密度培養(yǎng)相比于低密度培養(yǎng)能夠獲得更大程度的心肌分化,且該現(xiàn)象可能是由p38信號(hào)通路所介導(dǎo)。
【作者單位】： 武漢大學(xué)中南醫(yī)院心內(nèi)科;南方醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):81200119) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(項(xiàng)目編號(hào):121007)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells,ESCs)具有多向分化潛能,能夠分化成外胚層、中胚層和內(nèi)胚層3個(gè)胚層的多種細(xì)胞,包括中胚層的心肌細(xì)胞。ESCs源性的心肌細(xì)胞已經(jīng)用于心肌梗死和病態(tài)竇房結(jié)綜合征動(dòng)物模型的移植[1-2]。體外通過形成擬胚體(em bryoid bodies,EBs)促進(jìn)ESCs向心肌

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 商昌珍;閔軍;張磊;劉璐;鄧小耿;陳亞進(jìn);陳積圣;;丁酸鈉體外誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞分化為肝細(xì)胞[J];中國病理生理雜志;2006年12期

2 張緒超;陳惠芹;黃紹良;吳北燕;黃永蘭;蔡耘;;含人AGM區(qū)基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞為造血干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國病理生理雜志;2007年09期

3 李朋粉;孫瑩璞;;胚胎干細(xì)胞維持基因組穩(wěn)定性機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志;2009年03期

4 邢變枝;陳紅;錢坤;湛彥強(qiáng);張?zhí)K明;;胚胎干細(xì)胞定向分化為脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年01期

5 胡安斌;何曉順;黃冰;蔡繼業(yè);;上皮型鈣粘蛋白在小鼠胚胎干細(xì)胞體外分化中動(dòng)態(tài)表達(dá)及與細(xì)胞黏附狀態(tài)關(guān)系[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年45期

6 歐東波;陳瑞;鄭強(qiáng)蓀;郭菁菁;郭萬剛;劉雄濤;;胚胎干細(xì)胞在體外模擬心肌生長環(huán)境中向心肌分化[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年04期

7 傅玉如,陳s，

本文編號(hào)：1158916