本文關鍵詞：擬胚體高密度培養(yǎng)促進小鼠胚胎干細胞向心肌細胞分化

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【摘要】：目的探討擬胚體(EBs)培養(yǎng)密度對小鼠胚胎干細胞(ESCs)心肌細胞分化的影響。方法小鼠ESCs經過懸滴培養(yǎng)后形成EBs后,以高、低密度(120、60個EBs/60mm組織培養(yǎng)皿)貼壁培養(yǎng),免疫熒光檢測心肌特異性蛋白肌鈣蛋白T(TnT)的表達。在不同時間點計算不同密度組搏動EBs百分比;RT-PCR檢測Nkx2.5、GATA4、β-MHC及ANF基因表達水平;Western-blot檢測TnT及p38表達水平。結果通過懸滴培養(yǎng)法形成的EBs能夠出現(xiàn)自發(fā)性搏動并且有TnT表達。高密度培養(yǎng)組與低密度培養(yǎng)組相比具有更高的搏動EBs百分比,Nkx2.5、GATA4、β-MHC和ANF基因高表達水平,以及TnT蛋白高表達水平(P0.05)。高密度培養(yǎng)組的p38活性更高,使用p38特異性阻斷劑SB203580能夠降低高密度組搏動EBs百分比和TnT蛋白表達水平。結論 EBs貼壁培養(yǎng)密度是影響ESCs向心肌細胞分化的一個重要因素,EBs高密度培養(yǎng)相比于低密度培養(yǎng)能夠獲得更大程度的心肌分化,且該現(xiàn)象可能是由p38信號通路所介導。
【作者單位】： 武漢大學中南醫(yī)院心內科;南方醫(yī)科大學神經生物學教研室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(項目編號:81200119) 中央高校基本科研業(yè)務費專項資金(項目編號:121007)
【分類號】：R329
【正文快照】： 胚胎干細胞(embryonic stem cells,ESCs)具有多向分化潛能,能夠分化成外胚層、中胚層和內胚層3個胚層的多種細胞,包括中胚層的心肌細胞。ESCs源性的心肌細胞已經用于心肌梗死和病態(tài)竇房結綜合征動物模型的移植[1-2]。體外通過形成擬胚體(em bryoid bodies,EBs)促進ESCs向心肌

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7 傅玉如,陳s，

本文編號：1158916