本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌ESX-1分泌蛋白ESAT-6增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能

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【摘要】：【目的】研究結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)分泌蛋白ESAT-6(early secreted antigenictarget of 6 kDa)對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響�！痉椒ā坑弥亟M質(zhì)粒pFLAG-ESAT-6和pFLAG-EGFP轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞,經(jīng)G418篩選,PCR、RT-PCR和Western blot鑒定,獲得穩(wěn)定表達(dá)flag-ESAT-6和flag-EGFP的RAW細(xì)胞系,然后用流式細(xì)胞術(shù)觀察各穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系吞噬熒光微球的能力,并用共聚焦顯微鏡和菌落計(jì)數(shù)法檢測(cè)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系吞噬大腸桿菌(Escherichia coli)的能力�！窘Y(jié)果】獲得了穩(wěn)定表達(dá)flag-ESAT-6的RAW-E6細(xì)胞系和表達(dá)flag-EGFP的RAW-EGFP細(xì)胞系;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明RAW-E6吞噬熒光微球的能力顯著強(qiáng)于野生型細(xì)胞系RAW264.7和對(duì)照細(xì)胞系RAW-EGFP;菌落計(jì)數(shù)和激光共聚焦分析表明RAW-E6細(xì)胞系吞噬E.coli的能力也顯著強(qiáng)于RAW264.7和RAW-EGFP�！窘Y(jié)論】通過胞內(nèi)表達(dá)發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌分泌蛋白ESAT-6能夠增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能,這將為深入理解結(jié)核分枝桿菌的致病機(jī)制提供新的思路。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30972772) 北京市自然科學(xué)基金(5122035)~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的結(jié)核病近些年有死灰復(fù)燃的趨勢(shì),目前全球大約有20億人感染該病原菌,每年約200萬患者因結(jié)核而死亡[1]。結(jié)核分枝桿菌在進(jìn)入機(jī)體后被巨噬細(xì)胞所吞噬,但能夠在巨噬細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期生存并生長(zhǎng)繁殖,在一定時(shí)期后引起巨噬細(xì)胞死亡,這被認(rèn)

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