本文關(guān)鍵詞：確證家兔外周血中存在具有多向分化能力的間充質(zhì)干細(xì)胞

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【摘要】：本研究確證家兔外周血中存在具有多向分化潛能的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)。取成年新西蘭大白兔,經(jīng)每日皮下注射粒細(xì)胞集落刺激因子30μg/kg動(dòng)員6 d后采集外周血樣品,用Ficoll密度梯度離心和貼壁培養(yǎng)法分離純化外周血間充質(zhì)干細(xì)胞(PBMSC),鏡下觀察其生長(zhǎng)形態(tài)并繪制增殖曲線(xiàn);流式細(xì)胞術(shù)分析其表型特征;并分別對(duì)培養(yǎng)的PBMSC進(jìn)行成骨、成軟骨及成脂細(xì)胞誘導(dǎo)分化能力鑒定。結(jié)果表明:①原代培養(yǎng)24 h后,可見(jiàn)較多短梭形及多角形貼壁細(xì)胞,3-4 d后出現(xiàn)集落樣生長(zhǎng),傳代培養(yǎng)的PBMSC形態(tài)均一、呈長(zhǎng)梭形漩渦狀生長(zhǎng);②PBMSC增殖能力旺盛,培養(yǎng)2 d后進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞倍增時(shí)間為37.4 h;③流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示,培養(yǎng)的PBMSC高表達(dá)CD29,不表達(dá)CD14;④PBMSC經(jīng)成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d后,茜素紅染色顯示有明顯的鈣結(jié)節(jié)形成;經(jīng)微團(tuán)無(wú)血清軟骨培養(yǎng)體系誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d后,細(xì)胞團(tuán)切片,阿利新藍(lán)染色呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng);經(jīng)成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d后,油紅染色顯示誘導(dǎo)細(xì)胞胞漿內(nèi)有大量脂滴。結(jié)論:成功從兔外周血中分離培養(yǎng)了PBMSC,在適宜誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下具有向成骨、成軟骨、成脂分化的能力。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院暨附屬醫(yī)院貴州省細(xì)胞工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;遵義醫(yī)學(xué)院暨附屬醫(yī)院人體解剖學(xué)教研室;遵義醫(yī)學(xué)院暨附屬醫(yī)院形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào)81060148)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.28
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)廣泛存在于多種成體和胚胎組織中,除適宜條件下具有多向分化能力外,還具有體外擴(kuò)增能力強(qiáng)、抗原性弱的特點(diǎn),被認(rèn)為是組織損傷性疾病治療的理想種子細(xì)胞來(lái)源[1-3]。目前為止,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMM

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【相似文獻(xiàn)】

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