本文關(guān)鍵詞：利用改良后的脾內(nèi)免疫和半固體培養(yǎng)基法制備單克隆抗體

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【摘要】：旨在利用改良后的脾內(nèi)免疫和半固體培養(yǎng)基法制備單克隆抗體,節(jié)約免疫原用量、簡化試驗(yàn)操作、一步法篩選和克隆雜交瘤細(xì)胞、縮短單抗制備周期。通過局部麻醉小鼠脾臟區(qū)域皮膚,切開后透過腹膜直接向脾臟內(nèi)注射微量抗原,使小鼠的脾細(xì)胞在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng),尾靜脈注射強(qiáng)化免疫后進(jìn)行細(xì)胞融合;選取半固體培養(yǎng)基(甲基纖維素、軟瓊脂)法,以有限稀釋法作對照篩選分泌高效價(jià)抗體的雜交瘤細(xì)胞。結(jié)果顯示,與傳統(tǒng)的單抗制備方法相比,改進(jìn)后的脾內(nèi)免疫操作更簡單,聯(lián)合尾靜脈注射,使用微量免疫原在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生高效價(jià)抗體;半固體培養(yǎng)基甲基纖維素濃度在1.1%條件下,獲得克隆團(tuán)較多,陽性率較高。本研究方法適用于大規(guī)模制備單克隆抗體。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)生物工程系;鄭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院;河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;河南省生物工程技術(shù)研究中心;
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 自從1975年雜交瘤技術(shù)創(chuàng)建以來,單克隆抗體對于免疫學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、抗獨(dú)特型疫苗、生物導(dǎo)彈治療、食品及農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)等多領(lǐng)域的發(fā)展都起到重要的推動(dòng)作用。但目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室制備單克隆抗體沿用腹腔注射、有限稀釋等常規(guī)方法,耗時(shí)、費(fèi)力,不適合大規(guī)模操作制備單抗。國內(nèi)外均有

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