本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓來源巨噬細胞體外培養(yǎng)及極化相關(guān)實驗方法的建立

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【摘要】：目的建立小鼠骨髓來源巨噬細胞體外培養(yǎng),并將其極化為M1和M2型巨噬細胞的方法。方法獲取小鼠骨髓細胞,以GM-CSF誘導其中單核細胞向巨噬細胞分化發(fā)育,并輔以LPS和IFN-γ以及IL-4刺激巨噬細胞分別向M1型和M2型分化。采用流式細胞術(shù)、實時定量PCR和ELISA的實驗檢測極化后細胞內(nèi)以及細胞培養(yǎng)上清中的標志性細胞因子如IL-12、IL-10、Arg1、Ym1、MMR等的表達情況。結(jié)果形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)骨髓獲取的細胞經(jīng)誘導分化后呈現(xiàn)巨噬細胞特征性的貼壁形態(tài);流式細胞術(shù)行胞內(nèi)染色表明,極化后的M1型與M2型巨噬細胞各自表達其特征性的細胞因子IL-12和Arg1;實時定量PCR和ELISA分別檢測所培養(yǎng)細胞胞內(nèi)以及培養(yǎng)上清中的細胞因子,結(jié)果表明所刺激的M1型巨噬細胞高表達IL-12、iNOS、TNF-α等炎性因子,而M2型巨噬細胞表達MMR、Arg1、Ym1等標志因子。結(jié)論建立了穩(wěn)定的M1和M2型巨噬細胞體外培養(yǎng)體系。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學基礎(chǔ)部醫(yī)學遺傳與發(fā)育生物學教研室;第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細胞 巨噬細胞極化 體外培養(yǎng)
【基金】：國家自然科學基金(31130019)
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 巨噬細胞是一類在體內(nèi)發(fā)揮重要免疫效應(yīng)的細胞,為體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)維持和組織防御提供保障。一方面它可以通過吞噬作用直接吞噬降解病原微生物和異源物質(zhì),另一方面其可通過與多種其他的免疫細胞如NK細胞、T細胞相互作用從而發(fā)揮進一步的防御功能[1]。巨噬細胞的極化是近年來提出的

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6 王R，

本文編號：1132025