乙肝病毒X基因可調(diào)控表達(dá)細(xì)胞模型的構(gòu)建
本文關(guān)鍵詞:乙肝病毒X基因可調(diào)控表達(dá)細(xì)胞模型的構(gòu)建
更多相關(guān)文章: 乙型肝炎病毒基因 慢病毒表達(dá)載體 四環(huán)素調(diào)控 可誘導(dǎo)表達(dá)
【摘要】:利用四環(huán)素誘導(dǎo)型慢病毒系統(tǒng)(Lentil-XTMTet-On Advanced Inducible Expression System)構(gòu)建了含有乙肝病毒X基因(HBx)的可誘導(dǎo)表達(dá)載體質(zhì)粒,利用慢病毒包裝細(xì)胞系HEK293T細(xì)胞分別獲得含有調(diào)控元件rt-TA和HBx基因的病毒顆粒,滴度達(dá)到108LPs/mL。將兩種病毒先后感染HepG2肝癌細(xì)胞系,分別利用G418和Puromycin抗生素篩選獲得整合有HBx基因的穩(wěn)定細(xì)胞株。在體系中加入Dox時,應(yīng)用RT-PCR和Western blot方法驗證了HBx基因的可誘導(dǎo)表達(dá)?烧T導(dǎo)表達(dá)細(xì)胞模型構(gòu)建成功,為進(jìn)一步研究HBx基因在對宿主感染致病和免疫耐受中的作用提供了一種較理想的試驗?zāi)P汀?br/> 【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)與微生物工程系;
【關(guān)鍵詞】: 乙型肝炎病毒基因 慢病毒表達(dá)載體 四環(huán)素調(diào)控 可誘導(dǎo)表達(dá)
【基金】:“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”科技重大專項(2008ZX10002-002) 國家自然科學(xué)基金項目(30901315)
【分類號】:R373.21
【正文快照】: 我國是乙肝高發(fā)區(qū),乙型肝炎表面抗原(HBsAg)攜帶率為7.18%,慢性乙型肝炎病毒感染者約9 300萬例[1],每年由于HBV引起的肝硬化和肝癌造成263 000人死亡[2]。HBV感染與原發(fā)性肝癌之間存在著密切關(guān)系,但由于缺乏有效的體外病毒感染和復(fù)制模型系統(tǒng),乙肝及相關(guān)的原發(fā)性肝癌的基礎(chǔ)研
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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10 任來峰;張p蕘,
本文編號:1129760
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