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乙肝病毒X基因可調(diào)控表達(dá)細(xì)胞模型的構(gòu)建

發(fā)布時間:2017-11-02 03:19

  本文關(guān)鍵詞:乙肝病毒X基因可調(diào)控表達(dá)細(xì)胞模型的構(gòu)建


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【摘要】:利用四環(huán)素誘導(dǎo)型慢病毒系統(tǒng)(Lentil-XTMTet-On Advanced Inducible Expression System)構(gòu)建了含有乙肝病毒X基因(HBx)的可誘導(dǎo)表達(dá)載體質(zhì)粒,利用慢病毒包裝細(xì)胞系HEK293T細(xì)胞分別獲得含有調(diào)控元件rt-TA和HBx基因的病毒顆粒,滴度達(dá)到108LPs/mL。將兩種病毒先后感染HepG2肝癌細(xì)胞系,分別利用G418和Puromycin抗生素篩選獲得整合有HBx基因的穩(wěn)定細(xì)胞株。在體系中加入Dox時,應(yīng)用RT-PCR和Western blot方法驗證了HBx基因的可誘導(dǎo)表達(dá)?烧T導(dǎo)表達(dá)細(xì)胞模型構(gòu)建成功,為進(jìn)一步研究HBx基因在對宿主感染致病和免疫耐受中的作用提供了一種較理想的試驗?zāi)P汀?br/> 【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)與微生物工程系;
【關(guān)鍵詞】乙型肝炎病毒基因 慢病毒表達(dá)載體 四環(huán)素調(diào)控 可誘導(dǎo)表達(dá)
【基金】:“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”科技重大專項(2008ZX10002-002) 國家自然科學(xué)基金項目(30901315)
【分類號】:R373.21
【正文快照】: 我國是乙肝高發(fā)區(qū),乙型肝炎表面抗原(HBsAg)攜帶率為7.18%,慢性乙型肝炎病毒感染者約9 300萬例[1],每年由于HBV引起的肝硬化和肝癌造成263 000人死亡[2]。HBV感染與原發(fā)性肝癌之間存在著密切關(guān)系,但由于缺乏有效的體外病毒感染和復(fù)制模型系統(tǒng),乙肝及相關(guān)的原發(fā)性肝癌的基礎(chǔ)研

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 翟偉戎;G、Vajta;;乙型肝炎病毒活體內(nèi)復(fù)制的無胸腺小鼠模型[J];實驗動物與比較醫(yī)學(xué);1991年01期

2 馬清鈞;;乙型肝炎病毒adw亞型基因組的無性繁殖成功[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1983年02期

3 成軍;董菁;劉妍;李莉;斯崇文;王勤環(huán);張玲霞;陳菊梅;;乙型肝炎病毒準(zhǔn)種研究的臨床意義[J];世界華人消化雜志;2002年02期

4 董菁,楊倩,成軍;乙型肝炎病毒基因組前-X區(qū)的分子流行病學(xué)研究[J];世界華人消化雜志;2004年04期

5 ;我國破譯乙肝病毒基因組新編碼基因[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2004年04期

6 徐夏蓮,辛宏,張新軍,任芳麗,王銀銀,常智杰;利用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)研究CHIP對TGF-β信號通路的抑制性調(diào)節(jié)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2005年06期

7 詹勤,張欣欣;乙型肝炎病毒基因型與基因變異的關(guān)系[J];國外醫(yī)學(xué).流行病學(xué).傳染病學(xué)分冊;2005年05期

8 劉冰;陳華根;彭昭國;;乙型肝炎病毒基因型與相關(guān)肝病防治[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2006年08期

9 邵玲;張男;;乙型肝炎病毒基因分型方法簡述[J];人人健康(醫(yī)學(xué)導(dǎo)刊);2008年05期

10 任來峰;張p蕘,

本文編號:1129760


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