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液-質(zhì)聯(lián)用法對生物樣本中鞘氨醇1-磷酸的微量測定

發(fā)布時間:2017-11-01 00:00

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【摘要】:目的本文旨在建立一種簡便的鞘氨醇1-磷酸分離提取方法,并結(jié)合液-質(zhì)聯(lián)用法快速檢測生物樣本中納克水平的鞘氨醇1-磷酸。方法采用甲醇沉淀結(jié)合超聲萃取的方法分離鞘氨醇1-磷酸,高速離心去除大顆粒后的上清液采用液-質(zhì)聯(lián)用儀在選擇性離子監(jiān)測模式下進(jìn)行定量分析。結(jié)果該分離提取鞘氨醇1-磷酸的方法簡便快捷,鞘氨醇1-磷酸在選擇性離子監(jiān)測模式下的定量限為159.7 pg,其在人血漿中的含量為128.8±33.3μg/L;在C57 BL/6小鼠血漿、心、肝、肺、腎和腦中的含量分別為181.8±21.1μg/L、37.6±2.8 ng/g、54.9±4.9 ng/g、230.1±60.5 ng/g、21.5±6.7 ng/g、102.2±23.8 ng/g。結(jié)論甲醇提取分離法可簡便快捷地獲得血漿及臟器中的鞘氨醇1-磷酸,結(jié)合液-質(zhì)聯(lián)用儀可對血漿、組織臟器中的鞘氨醇1-磷酸進(jìn)行定量檢測具有高效、重現(xiàn)性好等優(yōu)點,特別適用于大量生物樣本的快速處理與分析。
【作者單位】: 山東省高校動脈粥樣硬化重點實驗室脂質(zhì)分析實驗室 泰山醫(yī)學(xué)院動脈粥樣硬化研究所;山東省高校動脈粥樣硬化重點實驗室基因功能實驗室 泰山醫(yī)學(xué)院動脈粥樣硬化研究所;山東省泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】鞘氨醇-磷酸 液-質(zhì)聯(lián)用儀 生物樣本
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30971098;81070247) 山東省泰山學(xué)者崗專項基金(ZD056,ZD057) 2012年泰山醫(yī)學(xué)院高層次課題培養(yǎng)計劃項目(330033)
【分類號】:R341
【正文快照】: 鞘氨醇1-磷酸(S1P)既可在細(xì)胞外作為G-蛋白偶聯(lián)受體的配體也可在細(xì)胞內(nèi)作為信使與尚未發(fā)現(xiàn)的靶位結(jié)合而發(fā)揮多種生物和病理學(xué)功能[1-3]。S1P可介導(dǎo)細(xì)胞增殖、分化和遷移等[4-6]。其廣泛的生物學(xué)功能及相關(guān)的機(jī)制是近年來關(guān)注的焦點[7-10]。1995年至今,國外先后報道了幾種S1P

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