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慢病毒表達(dá)載體pLentiTrident1-hBMP2-Neo-hNGF的構(gòu)建及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-10-31 12:04

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【摘要】:目的:構(gòu)建并鑒定含有人骨形成蛋白2(hBMP2)及神經(jīng)生長因子(hNGF)目的基因的慢病毒載體。方法:使用限制性內(nèi)切酶,將新霉素抗性基因(Neo)從載體pLentiTrident1-EGFP-Neo切下,插入pLentiTrident1空載體的相應(yīng)多克隆位點(diǎn)上,構(gòu)建出含新霉素抗性的表達(dá)載體。采用PCR擴(kuò)增得到hBMP2與hNGF的目的片段,通過多克隆位點(diǎn)將2個目的基因插入表達(dá)載體。對該重組載體進(jìn)行酶切鑒定、PCR鑒定以及DNA序列測序分析。結(jié)果:通過酶切鑒定及測序分析,慢病毒表達(dá)載體(plentiTrident 1-hBMP2-Neo-hNGF)構(gòu)建成功。結(jié)論:成功構(gòu)建了hBMP2與hNGF的共表達(dá)慢病毒載體,為研究神經(jīng)因素在骨組織再生中的作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 山東大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院牙周病科山東省口腔生物醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】骨形成蛋白 神經(jīng)生長因子 慢病毒載體
【基金】:山東省科技發(fā)展計(jì)劃(2010GSF10248) 山東大學(xué)自主創(chuàng)新基金自由探索項(xiàng)目(2009TS047)~~
【分類號】:R346
【正文快照】: 牙周病是一種慢性感染性疾病,會造成牙齦、牙周膜及牙槽骨破壞。牙槽骨的再生對牙周組織的恢復(fù)具有重要意義。骨組織發(fā)育與再生的研究表明,神經(jīng)和血管再生對牙周/骨再生組織的質(zhì)和量具有重要影響。骨形成蛋白屬于轉(zhuǎn)化生長因子β超家族,具有誘導(dǎo)骨形成的作用。其中,BMP2是目前

【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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10 白艷艷;人β-NGF基因在大腸桿菌與倉鼠卵巢細(xì)胞中的表達(dá)[D];蘇州大學(xué);2002年

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本文編號:1122253

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