本文關(guān)鍵詞：胰高血糖素樣肽-1類似物對人成骨細胞Wnt信號通路相關(guān)基因表達的影響

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【摘要】：[目的] 觀察胰高血糖素樣肽-1類似物(利拉魯肽)對體外培養(yǎng)人成骨細胞增殖及Wnt信號通路相關(guān)基因表達的影響,初步研究胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)對成骨細胞的作用及其機制,探索GLP-1與骨代謝的關(guān)系,為GLP-1應(yīng)用于糖尿病及骨質(zhì)疏松的治療提供新的思路。 [方法] 1.在體外對人成骨細胞進行原代培養(yǎng),倒置相差顯微鏡下觀察成骨細胞形態(tài),行骨鈣素免疫組化染色對成骨細胞進行鑒定。 2.向體外培養(yǎng)的人成骨細胞中,分別以不同濃度的GLP-1類似物(Omo1/L.10-7mol/L.10-8mol/L.10-9mol/L)作用,24h后采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)比色法檢測成骨細胞增殖率。 3.將不同濃度的GLP-1類似物(Omol/L.10-7mol/L.10-8mol/L、10-9mo1/L)作用于人成骨細胞,24h后通過實時熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測Wnt信號通路相關(guān)基因Wnt-3a、LRP-5、β-catenin mRNA的表達。 4.統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSSl3.0統(tǒng)計分析軟件包處理分析數(shù)據(jù),實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,并采用單因素方差分析,組間比較采用LSD-t法,P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 [結(jié)果] 1.倒置相差顯微鏡下觀察,原代培養(yǎng)的人成骨細胞呈長梭形、星形或不規(guī)則多邊形。骨鈣素免疫組化染色后胞漿可見棕黃色顆粒狀物質(zhì)。 2.不同濃度的GLP-1類似物(Omol/L.10-7.mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L)作用于人成骨細胞24h后,實驗各組成骨細胞0D值均增高,且隨著GLP-1給藥濃度的降低,成骨細胞OD值逐漸增高。實驗組與對照組比較,實驗組組間比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3.采用RT-PCR法檢測Wnt-3a、LRP-5、β-catenin mRNA的表達,結(jié)果顯示,低濃度GLP-1(10-9mol/L)上調(diào)人成骨細胞中Wnt-3a、LRP-5、β-catenin mRNA的表達,高濃度GLP-1(10-7mol/L、10-8mol/L)下調(diào)人成骨細胞中Wnt-3a、 LRP-5、β-catenin mRNA的表達。實驗組與對照組比較,實驗組組間比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 [結(jié)論] 1.胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)能促進人成骨細胞的增殖。 2.低濃度胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)上調(diào)wnt-3a、LRP-5、β-catenin mRNA的表達,可能通過Wnt信號通路參與成骨細胞增殖調(diào)控過程。 3.高濃度胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)下調(diào)Wnt-3a、LRP-5、β-catenin mRNA的表達,可能通過其他未知通路促進成骨細胞的骨形成過程。
【關(guān)鍵詞】：胰高血糖素樣肽-1 成骨細胞 增殖 Wnt信號通路
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R587.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-23
• 討論23-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻28-30
• 附圖30-34
• 綜述34-44
• 參考文獻41-44
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況44-45
• 致謝45-46
• 個人簡歷46

【參考文獻】

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本文編號：1121196