本文關(guān)鍵詞：共培養(yǎng)下內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖及分化的影響

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【摘要】：目的第一，解剖大鼠脊髓組織分離獲得NSCs，并進(jìn)行NSCs特異性標(biāo)志物Nestin檢測(cè)，以證實(shí)目的細(xì)胞即為NSCs；第二，在體外通過(guò)密度梯度離心法獲取外周血單個(gè)核細(xì)胞，再以多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)其分化得到EPCs，最后行EPCs的特異性檢測(cè)，證實(shí)目的細(xì)胞為EPCs；第三，在Transwell小室共培養(yǎng)模型中培養(yǎng)EPCs和NSCs，研究EPCs對(duì)NSCs增殖及分化的影響，為以后EPCs相關(guān)的細(xì)胞移植治療脊髓損傷（SCI）提供堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)，以及新的思路及方法。 方法運(yùn)用成熟的分離、培養(yǎng)及鑒定方法獲得SD大鼠的脊髓NSCs及外周血EPCs，再將二者置于Transwell小室進(jìn)行體外共培養(yǎng)，以單純的NSCs培養(yǎng)為對(duì)照，于第4d對(duì)神經(jīng)球的數(shù)目、直徑進(jìn)行測(cè)算，測(cè)算后將載有EPCs的Transwell小室上層移去，對(duì)下層的NSCs進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，第7d行MAP-2免疫熒光染色，熒光顯微鏡下觀察抗原表達(dá)并計(jì)算NSCs分化神經(jīng)元百分率，最后將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果共培養(yǎng)第4d于100倍視野下行NSCs球計(jì)數(shù)并測(cè)算NSCs球直徑，實(shí)驗(yàn)組NSCs球平均數(shù)目為（10.3±2.2）個(gè)，平均直徑為（48.0±5.3）μm，對(duì)照組NSCs球平均數(shù)目為（6.3±1.7）個(gè)，平均直徑為（33.3±5.9）μm，可見(jiàn)共培養(yǎng)的NSCs球數(shù)目實(shí)驗(yàn)組明顯多于對(duì)照組,直徑也呈現(xiàn)出大于對(duì)照組的趨勢(shì);共培養(yǎng)的NSCs神經(jīng)元分化率為（32.2±1.9）%，也明顯高于對(duì)照組的（14.7±1.8）%。 結(jié)論第一，通過(guò)解剖大鼠脊髓組織分離NSCs方法可行，經(jīng)培養(yǎng)后獲得細(xì)胞球均表達(dá)NSCs特異性標(biāo)志物Nestin，目的細(xì)胞為NSCs明確；第二，在體外通過(guò)密度梯度離心法獲取外周血單個(gè)核細(xì)胞，再以多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)其分化得到EPCs的方法可行，并且可以通過(guò)EPCs的特異性檢測(cè)，證實(shí)其為目的細(xì)胞EPCs；第三，在Transwell小室共培養(yǎng)模型下EPCs在能促進(jìn)NSCs增殖，并在一定程度上誘導(dǎo)NSCs向神經(jīng)元分化。這一實(shí)驗(yàn)成果的發(fā)現(xiàn)，為后續(xù)研究EPCs促進(jìn)NSCs增殖及向神經(jīng)元分化的機(jī)制提供了模板，并奠定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)，更為以后EPCs相關(guān)的細(xì)胞移植治療脊髓損傷（SCI）提供了新的思路及方法。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)皮祖細(xì)胞 神經(jīng)干細(xì)胞 共培養(yǎng) 脊髓損傷
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R651.2
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 1 引言10-12
• 2 材料和方法12-20
• 3 結(jié)果20-24
• 4 討論24-28
• 5 結(jié)論28-29
• 6 參考文獻(xiàn)29-32
• 附錄32-33
• 致謝33-34
• 綜述34-42
• 參考文獻(xiàn)40-42

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 何紅媛,王萍,夏冬,吳紹華;干細(xì)胞調(diào)控機(jī)制及體外培養(yǎng)影響因素的研究[J];四川解剖學(xué)雜志;2002年04期

2 沈政;尹宗生;高維陸;張輝;;脊髓損傷后反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng)及多能性鑒定[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年06期

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本文編號(hào)：1116615