本文關(guān)鍵詞：人2型糖尿病皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的無血清培養(yǎng)及純化

  更多相關(guān)文章： 角質(zhì)形成細(xì)胞 型糖尿病 原代培養(yǎng)

【摘要】：目的體外原代無血清培養(yǎng)人2型糖尿病皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞,并進(jìn)行純化。方法采用中性蛋白酶-胰蛋白酶兩步消化法分離人2型糖尿病皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞,使用無血清培養(yǎng)基進(jìn)行原代培養(yǎng),通過兩步消化傳代純化細(xì)胞,使用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞生長狀態(tài),WST-8法測(cè)定細(xì)胞增殖曲線,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其表型和純度。結(jié)果無血清培養(yǎng)并純化的角質(zhì)形成細(xì)胞呈典型的上皮形態(tài),第3代角質(zhì)形成細(xì)胞增殖曲線為S形,對(duì)數(shù)增長期的平均倍增時(shí)間為36.9 h,角蛋白陽性率為98.9%。結(jié)論建立高純度的人2型糖尿病皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的無血清培養(yǎng)方法。
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)研究室;中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院肛腸外科;中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院全科醫(yī)學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 角質(zhì)形成細(xì)胞 型糖尿病 原代培養(yǎng)
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(2012CB518103) 遼寧省科學(xué)技術(shù)計(jì)劃(2012225080) 沈陽市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃(F11-262-9-01)
【分類號(hào)】：R329.28
【正文快照】： 糖尿病(diabetes mellitus,DM)是發(fā)病最廣泛的內(nèi)分泌失調(diào)疾病,至2030年,糖尿病的全球發(fā)病人數(shù)將達(dá)5.52億[1]。糖尿病影響機(jī)體多種器官的功能,其中皮膚并發(fā)癥較為常見,糖尿病并發(fā)的難愈合創(chuàng)面是臨床治療的難題。糖尿病皮膚的表皮層較薄,其中的角質(zhì)形成細(xì)胞(keratinocytes,KC)與

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 雍軍光;閆黎;張倚珠;史美麗;;ACEI類藥物防治2型糖尿病早期腎病的研究[J];華夏醫(yī)學(xué);2013年05期

2 國蓉;鄒俊杰;何逸飛;劉志民;;津力達(dá)口服液對(duì)2型糖尿病模型大鼠血液和腎臟氧化應(yīng)激標(biāo)志物的影響[J];解放軍醫(yī)藥雜志;2013年08期

3 謝席勝;艾娜;王寶福;夏夢(mèng)迪;樊均明;;糖尿病腎病流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2013年10期

4 劉海峰;周祥山;龐甲佩;劉立崗;胡永水;張?jiān)d;;畢赤酵母表達(dá)人胰島素前體的純化和N末端不均一性分析[J];華東理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年05期

5 孫蓓;侯國芳;張霄蓓;郝曉甍;張晟;;Luminal B型乳腺癌合并糖尿病患者臨床病理特征及預(yù)后分析[J];中國腫瘤臨床;2013年17期

6 畢銘鑫;牛玉存;李雪;李穎;孫長顥;;青稞麥片對(duì)空腹血糖受損患者糖脂代謝的影響[J];衛(wèi)生研究;2013年05期

7 雍軍光;阮萍;馮博華;羅穎;;2型糖尿病患者紅細(xì)胞形態(tài)及胞膜彈性的變化及其臨床意義[J];中國糖尿病雜志;2013年11期

8 陳琰;劉桂鋒;吳玫;張桂珍;;2型糖尿病易感基因單核苷酸多態(tài)性分析技術(shù)的研究進(jìn)展[J];中國老年學(xué)雜志;2013年24期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 許嘯虎;陸付耳;董慧;;清熱燥濕法及其方藥治療2型糖尿病研究進(jìn)展[A];第九次全國中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)理論研究學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2013年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 趙書亮;2型糖尿病合并抑郁的影響因素研究[D];北京師范大學(xué);2012年

2 黎黎;替米沙坦激活過氧化物酶體增殖物活化受體δ改善小鼠胰島素抵抗及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 趙紫琴;替米沙坦對(duì)OLETF大鼠皮下和內(nèi)臟脂肪組織前炎癥因子表達(dá)的影響及其部位差異性[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

4 辛欣;五甲基槲皮素抗糖尿病大鼠腎臟纖維化的作用及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

5 姜貴全;落葉松樹皮原花青素的分級(jí)純化及催化降解研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2013年

6 呂琴;血清尿酸與2型糖尿病及糖尿病腎病關(guān)系的研究[D];華中科技大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋尚華;山茱萸活性成分提取分離及其治療糖尿病并發(fā)癥研究[D];西南大學(xué);2013年

2 楊潔;GLP-1R、PKA在2型糖尿病骨質(zhì)疏松大鼠肝組織表達(dá)[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

3 周帆;甘精胰島素與低精蛋白鋅胰島素對(duì)比治療2型糖尿病的低血糖風(fēng)險(xiǎn)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

4 喬蕾;纈沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟保護(hù)作用及對(duì)近端腎小管上皮細(xì)胞Na~+，，K~+-ATPase的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

5 舒何晶;黃連生物堿對(duì)解偶聯(lián)蛋白2的影響[D];西南大學(xué);2013年

6 王文娟;非增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病變的黃斑中心凹下脈絡(luò)膜厚度變化[D];暨南大學(xué);2013年

7 張巖;葛根芩連湯飲片煎煮與改良煮散對(duì)T2DM大鼠降糖療效的對(duì)比研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2013年

8 劉乃彬;血糖波動(dòng)對(duì)2型糖尿病大鼠種植體骨結(jié)合影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 徐少勇;陜西農(nóng)村糖尿病流行特點(diǎn)及東西部省份糖尿病特點(diǎn)分析[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

10 郭婕;糖尿病足骨髓炎患者患病及其截肢危險(xiǎn)因素研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱元杰;溫海;徐紅;黃欣;趙瑾;;隱球菌與體外培養(yǎng)角質(zhì)形成細(xì)胞的相互作用[J];臨床皮膚科雜志;2006年08期

2 石繼海,夏隆慶;角質(zhì)形成細(xì)胞的腺病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2000年03期

3 丁銳,沈彤,涂登云,魏凌珍,孫美芳,朱啟星;人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的胰蛋白酶消化分離及無血清培養(yǎng)[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2003年06期

4 王文清,劉玉峰,范雪莉;與角質(zhì)形成細(xì)胞相關(guān)自身抗體的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2000年04期

5 鄧辰亮,楊光輝,崔磊,楊軍,劉偉,曹誼林;人角質(zhì)形成細(xì)胞體外擴(kuò)增與生物學(xué)特征變化[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年04期

6 萬業(yè)宏,李承新,劉玉峰,高天文,夏汝山,黨育平,武彩霞;抗角蛋白16單克隆抗體對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖活性的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2001年03期

7 盧寧;朱平;劉玉峰;王剛;張海龍;趙小東;;實(shí)驗(yàn)室條件下人角質(zhì)形成細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)(英文)[J];中國臨床康復(fù);2006年01期

8 王凌峰;溫麗娟;榮志東;巴特;王宏;胡國林;蔣文杰;嚴(yán)智昌;;含AB型血清培養(yǎng)體系人角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年05期

9 朱元杰;顧菊林;陳江漢;趙瑾;仇蕓;溫海;;新生隱球菌對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞活力的作用研究[J];中國真菌學(xué)雜志;2011年01期

10 廖文俊,劉彥仿,劉玉峰;β-半乳糖苷酶基因轉(zhuǎn)染角質(zhì)形成細(xì)胞的瞬時(shí)表達(dá)檢測(cè)[J];臨床皮膚科雜志;1999年02期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳輝;李筱芳;沈永年;呂桂霞;劉維達(dá);;角質(zhì)形成細(xì)胞與紅色毛癬菌共孵育體系中角質(zhì)形成細(xì)胞TLR2及其信號(hào)通路中下游分子的表達(dá)[A];2006中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

2 連小華;楊恬;;表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中TNF-α對(duì)PAI-2表達(dá)的調(diào)節(jié)[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

3 朱元杰;溫海;徐紅;黃欣;趙瑾;;新生隱球菌與角質(zhì)形成細(xì)胞的體外相互作用[A];2006中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

4 李習(xí)玲;連小華;楊恬;;表皮角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及分化無血清模型的建立[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

5 連小華;楊恬;;表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中Ca~(2+)對(duì)tPA分泌的調(diào)節(jié)[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)、免疫細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2002年

6 連小華;楊恬;;小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中鈣離子對(duì)組織型纖溶酶原激活劑表達(dá)的調(diào)節(jié)及機(jī)理研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

7 羅敏;張玲;韓宏異;李瑪琳;;長波紫外線輻射人真皮成纖維細(xì)胞光老化模型的建立[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨青年學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2007年

8 采克俊;張易祥;丁海雷;丁志麗;張念慈;劉莉;;18天雞胚睪丸支持細(xì)胞的分離純化與鑒定[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨青年學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2007年

9 張曉明;金松君;相建海;;海鞘(Ciona Savignyi)卵巢組織細(xì)胞的原代培養(yǎng)和傳代[A];中國海洋湖沼學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2007年

10 周愛民;馮捷;馬慧群;徐漢卿;;Toll樣受體4在人體角質(zhì)形成細(xì)胞中的表達(dá)[A];2003中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周建大;原代成體皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)基因研究[D];中南大學(xué);2004年

2 胡冉;十三種化合物誘導(dǎo)的小鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞基因表達(dá)譜的聚類分析[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

3 葛茜;線蟲中細(xì)胞分泌特性和蛋白質(zhì)功能的研究[D];華中科技大學(xué);2007年

4 向若蘭;泛酸激酶4基因?qū)功?細(xì)胞凋亡的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

5 李e

本文編號(hào)：1113622