本文關(guān)鍵詞：TNF-α對HepG2細(xì)胞LXRα介導(dǎo)的膽固醇外流的影響及其分子機(jī)制

  更多相關(guān)文章： HepG細(xì)胞 腫瘤壞死因子 肝X受體α 膽固醇外流

【摘要】：目的:觀察腫瘤壞死因子α(TNF-α)對肝X受體α(LXRα)啟動子活性及其下游ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ABCA1和ABCG1)表達(dá)的影響,從而探討TNF-α加速HepG2細(xì)胞內(nèi)膽固醇積聚的分子機(jī)制。方法:構(gòu)建LXRα基因的啟動子表達(dá)載體,觀察炎癥因子TNF-α對LXRα啟動子活性的影響,進(jìn)一步將HepG2細(xì)胞分為對照組(control)、TNF-α組(20μg/L)、高脂組(LDL,100 mg/L)及聯(lián)合處理組(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用實(shí)時定量PCR和Western blotting檢測LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表達(dá)。[3H]標(biāo)記膽固醇,液體閃爍計(jì)數(shù)法檢測膽固醇外流量。油紅O染色和定量比色法分析細(xì)胞內(nèi)膽固醇的含量。結(jié)果:成功構(gòu)建LXRα啟動子的螢火蟲螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒,證明了該啟動子有明顯活性,TNF-α能明顯抑制LXRα啟動子的活性。進(jìn)一步檢測發(fā)現(xiàn),和對照組相比,TNF-α下調(diào)了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA與蛋白表達(dá)。高脂組膽固醇外流量增加,而TNF-α組膽固醇外流量明顯降低。油紅O染色顯示,TNF-α使細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)染色明顯增加。結(jié)論:TNF-α可通過抑制LXRα啟動子活性從而抑制HepG2細(xì)胞內(nèi)膽固醇外流導(dǎo)致肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)異常積聚。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)脂糖代謝性疾病重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室脂質(zhì)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： HepG細(xì)胞 腫瘤壞死因子 肝X受體α 膽固醇外流
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81070631;No.81070317;重點(diǎn)項(xiàng)目No.81030008)
【分類號】：R363
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liverdisease,NAFLD)是由多種原因引起的肝細(xì)胞內(nèi)中性脂肪(主要是甘油三酯和膽固醇酯)過度堆積的代謝性疾病。肝臟脂質(zhì)代謝穩(wěn)態(tài)的紊亂是構(gòu)成各種形式脂肪肝的基礎(chǔ),而炎癥在促進(jìn)肝細(xì)胞脂代謝紊亂中扮演重要角色。在生理狀態(tài)下肝臟內(nèi)膽

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 代小艷;唐朝克;;肝X受體在體內(nèi)膽固醇平衡中的作用[J];中國病理生理雜志;2006年09期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 于浩;劉娣;丁鐫;;豬LXRα基因的克隆、序列分析及表達(dá)研究[J];中國農(nóng)學(xué)通報(bào);2009年18期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 莫中成;AOPPs對巨噬細(xì)胞ABCA1表達(dá)與膽固醇流出的影響及機(jī)制[D];南華大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 顧文娟;阿托伐他汀對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中LXRα及其靶基因、炎癥因子、粘附因子表達(dá)的影響[D];中南大學(xué);2011年

2 徐小江;茯磚茶調(diào)節(jié)脂代謝的研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 代小艷;LXR激動劑T0901317抑制apoE-/-小鼠動脈粥樣硬化且促進(jìn)ABCA1表達(dá)[D];南華大學(xué);2007年

4 歐翔;肝X受體激動劑上調(diào)apoE基因敲除小鼠NPC1和NPC2的表達(dá)[D];南華大學(xué);2007年

5 郝新瑞;干擾素γ通過JAK-STAT1途徑抑制細(xì)胞ABCA1表達(dá)及膽固醇流出[D];南華大學(xué);2008年

6 曹冬黎;脂多糖下調(diào)泡沫細(xì)胞ABCA1的表達(dá)與核因子-κB途徑相關(guān)[D];南華大學(xué);2008年

7 夏曉莉;肝氣郁在代謝綜合征中作用的基礎(chǔ)和臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2010年

8 劉協(xié)紅;D4-F對THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞ABCA1表達(dá)及膽固醇流出的影響[D];南華大學(xué);2010年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 唐朝克,賀修勝,易光輝,王佐,袁中華,劉錄山,危當(dāng)恒,王燕,楊永宗;肝X受體α在泡沫細(xì)胞膽固醇流出中的調(diào)控作用[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2003年06期

2 唐朝克,易光輝,阮長耿,楊永宗;ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體超家族對膽固醇吸收和血漿植物甾醇水平的調(diào)節(jié)作用[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2004年05期

3 唐朝克,楊峻浩,易光輝,王佐,劉錄山,萬載陽,袁中華,阮長耿,楊永宗;油酸對THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1表達(dá)和膽固醇流出的影響[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào);2003年12期

4 ;Effect of Apolipoprotein A-I on ATP Binding Cassette Transporter A1 Degradation and Cholesterol Efflux in THP-1 Macrophage-derived Foam Cells[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2004年03期

5 唐朝克,楊永宗,易光輝,王燕,危當(dāng)恒,王佐;三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1在THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇流出中的作用[J];中國病理生理雜志;2003年08期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王魯文,龔作炯,楊麗華;HCV5′非編碼區(qū)和核心區(qū)重組真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其細(xì)胞內(nèi)定位[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年02期

2 施瓊;翁亞光;徐遠(yuǎn)久;蔣洪彥;劉子杰;劉青松;蔡燕;;細(xì)胞分裂調(diào)控基因MAD2與GFP融合的真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年02期

3 沃壯群;;腫瘤壞死因子[J];生命的化學(xué);1986年05期

4 朱迅;楊貴貞;;重組人類腫瘤壞死因子(rhTNF)研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1987年06期

5 李子海,朱立平,謝少文;腫瘤壞死因子(TNF)研究進(jìn)展[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1988年04期

6 王玉蘭;陳祖瓊;;對腫瘤壞死因子的新認(rèn)識——TNF-α和-β的生物學(xué)活性比較[J];國際免疫學(xué)雜志;1988年06期

7 童善慶,陸德源;腫瘤壞死因子研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代免疫學(xué);1989年04期

8 楊吉明;腫瘤壞死因子的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1990年02期

9 孫永良;經(jīng)內(nèi)毒素誘導(dǎo)人巨噬細(xì)胞系THP1產(chǎn)生的不同于白細(xì)胞介素-1和腫瘤壞死因子-α的因子在體內(nèi)具有刺激多形核白細(xì)胞浸潤的作用[J];國際免疫學(xué)雜志;1990年06期

10 何革;李霖;;腫瘤壞死因子與瘧疾感染[J];國際醫(yī)學(xué)寄生蟲病雜志;1991年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 柴家科;申傳安;;腫瘤壞死因子對骨骼肌細(xì)胞內(nèi)泛素系統(tǒng)基因表達(dá)的調(diào)節(jié)及意義[A];全國燒傷創(chuàng)面處理、感染專題研討會論文匯編[C];2004年

2 李永秋;劉麗萍;;腫瘤壞死因子與急性卒中后的多器宮功能障礙綜合征[A];2000年全國危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2000年

3 侯平;張洪峰;肖衛(wèi)國;;腫瘤壞死因子對樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)作用及其對紅系造血的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會全國風(fēng)濕病學(xué)年會論文匯編[C];2003年

4 顧瑋玲;喇端端;;不同氣體對Wistar大鼠腹腔巨噬細(xì)胞及腹腔液腫瘤壞死因子-α的影響[A];首屆滬浙婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)論壇暨2006年浙江省婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

5 薛欣;張永祥;;腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)ATF6、IRE1介導(dǎo)的未折疊蛋白反應(yīng)[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

6 韓媛;黃松明;張愛華;張維真;吳紅梅;鮑華英;;腫瘤壞死因子-α和熱休克蛋白70-2基因多態(tài)性與兒童過敏性紫癜的相關(guān)性研究[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

7 陳衛(wèi)華;陳燕;崔國惠;;腫瘤壞死因子α和姜黃素調(diào)節(jié)Raji、U937細(xì)胞內(nèi)VEGF的表達(dá)及基質(zhì)膠中ECV細(xì)胞血管形成作用的研究[A];第10屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2005年

8 馮靖;陳寶元;郭美南;曹潔;趙海燕;梁東春;左愛軍;;內(nèi)皮細(xì)胞在不同間歇低氧模式下白細(xì)胞介素6和腫瘤壞死因子α水平的變化[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

9 應(yīng)斌武;劉代順;文富強(qiáng);;腫瘤壞死因子α刺激A549細(xì)胞后細(xì)胞間黏附分子1的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

10 李建生;高劍峰;周友龍;劉軻;;老齡大鼠腦缺血再灌注炎癥級聯(lián)反應(yīng)變化的意義[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第五屆基礎(chǔ)理論研究專業(yè)委員會學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 ;1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及在HepG2細(xì)胞中的表達(dá)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

2 張中橋;NDRG2可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

3 樊鳳輝;新型抗體有望同時治療兩種疾病[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

4 張建琛　李靜;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)可調(diào)控細(xì)胞死亡方式的人體蛋白激酶[N];科技日報(bào);2009年

5 張獻(xiàn)懷;我國創(chuàng)傷膿毒癥研究又有新進(jìn)展[N];大眾科技報(bào);2003年

6 何帆;自身免疫和炎癥為CTD-PAH主要發(fā)病機(jī)制[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年

7 張?zhí)锟?沒有免疫就沒有生命[N];文匯報(bào);2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蘇海川;腫瘤壞死因子凋亡相關(guān)配體基因的克隆、表達(dá)純化以及生物活性的初步研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

2 韓聚強(qiáng);改造HBV作為肝靶向性基因治療載體的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

3 夏立新;幾種因子對HaCaT細(xì)胞合成結(jié)合珠蛋白影響的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

4 徐錦榮;CCK-8對rTNF-α誘導(dǎo)RSC-364增殖和分泌功能的影響及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

5 董劭壯;炎癥對脂肪細(xì)胞功能的影響及其機(jī)制探討[D];中南大學(xué);2007年

6 萬一;TNFα自體疫苗的制備、篩選及其對TNFα表達(dá)過高相關(guān)疾病治療作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 張小梅;羥基酪醇生物學(xué)作用的細(xì)胞與分子機(jī)制研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

8 王茜;四環(huán)素調(diào)控HSV-tk基因表達(dá)及體外殺傷腫瘤細(xì)胞的研究[D];吉林大學(xué);2009年

9 楊海捷;從噬菌體展示隨機(jī)七、十二肽庫篩選內(nèi)毒素結(jié)合肽及其生物學(xué)活性研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 劉輝;LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞珠高、低反應(yīng)并存及其機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姚琳;EGCG對LPS誘導(dǎo)的p38 MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用研究[D];南京師范大學(xué);2005年

2 郭松佳;人臍血樹突狀細(xì)胞體外培養(yǎng)及免疫功能的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2006年

3 文曉燕;內(nèi)異癥大鼠模型的建立及血管形成在其發(fā)病過程中的作用[D];大連醫(yī)科大學(xué);2007年

4 王慧;RGD特異性結(jié)合多肽與新型腫瘤壞死因子融合基因的克隆表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的抑瘤活性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

5 張映;GFE-1多肽與新型腫瘤壞死因子融合基因的克隆、表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的組織分布研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

6 萬輝;重組乙肝病毒介導(dǎo)的干擾素α的轉(zhuǎn)基因表達(dá)[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 張曉榮;A549核因子-κB和腫瘤壞死因子在香煙煙霧提取物刺激及阿奇霉素干預(yù)下的變化[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

8 郭志遠(yuǎn);含hTRAIL及LUC基因的腺病毒雙表達(dá)載體的構(gòu)建[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

9 王東琳;磁分離酶聯(lián)免疫測定系統(tǒng)在細(xì)胞因子檢測中的應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 趙麗麗;還原型谷胱甘肽對缺氧/復(fù)氧培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞的干預(yù)性研究[D];山東大學(xué);2005年

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本文編號：1104044