發(fā)布時間：2017-10-26 18:05

  本文關(guān)鍵詞：成年大鼠骨骼肌干細(xì)胞的制備與新型培養(yǎng)方法

  更多相關(guān)文章： 成年大鼠 骨骼肌干細(xì)胞 懸浮培養(yǎng)法

【摘要】：目的:建立高效分離和擴(kuò)增成年大鼠骨骼肌干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法。方法:通過混合酶消化法從少量成年大鼠骨骼肌樣品中分離出骨骼肌干細(xì)胞;采用懸浮培養(yǎng)法培養(yǎng)獲得骨骼肌干細(xì)胞團(tuán),批量擴(kuò)增骨骼肌干細(xì)胞;用qRT-PCR和免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測干細(xì)胞標(biāo)志物Nanog、Oct4和骨骼肌干細(xì)胞標(biāo)志物肌源性因子5(myogenic factor 5,Myf5)、配對盒蛋白7(paired box protein 7,Pax7)的表達(dá);成脂或成骨分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)檢測骨骼肌干細(xì)胞的多功能性。結(jié)果:采用混合酶消化法可獲得骨骼肌干細(xì)胞單細(xì)胞,在懸浮的培養(yǎng)條件下能快速克隆成骨骼肌細(xì)胞團(tuán),貼壁培養(yǎng)后能看到骨骼肌干細(xì)胞從細(xì)胞團(tuán)中爬出來,和傳統(tǒng)的差速貼壁方法相比懸浮培養(yǎng)法獲得的骨骼肌干細(xì)胞純度更高,細(xì)胞狀態(tài)更好,干性因子Nanog、Oct 4和骨骼肌干細(xì)胞標(biāo)志物Myf5、Pax 7的表達(dá)更高(P0.05);在不同培養(yǎng)基的誘導(dǎo)下能向骨骼肌、成骨和脂肪細(xì)胞系分化。結(jié)論:懸浮培養(yǎng)法能獲得大批量干性好、純度高、具有多向分化潛能的骨骼肌干細(xì)胞,從而為肌肉相關(guān)疾病的細(xì)胞治療提供優(yōu)良的種子細(xì)胞。
【作者單位】： 廣東省心血管病研究所;廣東省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)研究中心;廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 成年大鼠 骨骼肌干細(xì)胞 懸浮培養(yǎng)法
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81120108003)
【分類號】：R329
【正文快照】： 肌肉營養(yǎng)不良是一種X連鎖隱性遺傳病,其中Duchenne型肌營養(yǎng)不良是最常見與最重要的一種類型,主要發(fā)生在兒童身上,大多數(shù)患兒死于20歲前,目前沒有比較好的治療方法。干細(xì)胞移植呈現(xiàn)出比較好的前景,其中在骨骼肌里面存在的骨骼肌干細(xì)胞,為治療Duchenne型肌營養(yǎng)不良提供了一種新

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 呂萍;馬景濤;;骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離及培養(yǎng)[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年04期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙科研,俞世強(qiáng),蔡振杰,吳鐵軍,胡軍,周和平;大鼠成肌細(xì)胞體外培養(yǎng)及其自發(fā)收縮特性[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2004年01期

2 邵素霞,張雷,趙春芳,鄭力芬,閆蘊(yùn)力,馬洪駿;新生大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)及標(biāo)記方法[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2004年01期

3 呂捷,趙春禮,魯強(qiáng),張進(jìn)祿,徐群淵;成年動物骨骼肌細(xì)胞原代培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染外源基因的初步研究[J];解剖學(xué)報;2000年01期

4 李志華,宋錦，

本文編號：1099809