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大鼠髓系來源的樹突狀細胞的體外誘導及功能鑒定

發(fā)布時間:2017-10-26 15:36

  本文關鍵詞:大鼠髓系來源的樹突狀細胞的體外誘導及功能鑒定


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【摘要】:目的探討建立合適的大鼠骨髓源性未成熟樹突狀細胞(imDC)的培養(yǎng)方法,并對其生物學特性進行評價。方法分別以不同劑量的粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素(IL)-4誘導分化獲得大鼠骨髓源性樹突狀細胞(DC),比較收獲率及特異性標記蛋白(OX62)陽性的DC數(shù)量,獲得最佳細胞因子濃度。并用流式細胞儀分析DC表型,混合淋巴細胞反應(MLR)檢測其刺激同種T細胞增殖能力,ELISA法測定MLR上清IL-12、γ-免疫反應性纖維結合素(IFN-γ)水平。結果 GM-CSF 5 ng/ml可誘導出更高的收獲率及OX62的陽性率。GM-CSF 5 ng/ml培養(yǎng)7 d的DC,表達中等水平的主要組織相容性(抗原)復合物Ⅱ類(MHC II)和低水平的CD86;其分泌少量IL-12;刺激同種T細胞增殖能力極低。脂多糖(LPS)刺激后MHCⅡ、CD86表達明顯增加;分泌IL-12和IFN-γ增加;刺激同種T細胞增殖能力增強。結論 GM-CSF 5 ng/ml為誘導大鼠骨髓源性imDC的最佳劑量,培養(yǎng)7~9 d可以獲得足夠數(shù)量和純度的imDC。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院普通外科;蘇州大學第一附屬醫(yī)院普通外科;
【關鍵詞】大鼠 骨髓 未成熟樹突狀細胞 誘導
【基金】:江蘇省自然科學基金(編號:BK2007057)
【分類號】:R392
【正文快照】: 樹突狀細胞(dendritic cell,DC)是已知的體內功能最強的專職抗原遞呈細胞(antigen presentingcell,APC),來源于CD34+骨髓前體細胞。目前在大鼠DC的分離、培養(yǎng)及鑒定方面研究甚少,尤其是如何獲得純度較高、狀態(tài)穩(wěn)定的大鼠未成熟樹突狀細胞(immature dendritic cell,imDC)未見

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本文編號:1099315


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