發(fā)布時間：2017-10-26 07:21

  本文關鍵詞：大鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)鑒定以及向神經干細胞分化的實驗研究

  更多相關文章： 骨髓間充質干細胞 全骨髓貼壁培養(yǎng)法 誘導分化 神經干細胞 酸性成纖維細胞生長因子

【摘要】：目的:體外培養(yǎng)并鑒定大鼠骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),研究其生物學特性,初步探索酸性成纖維細胞生長因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)誘導其向神經干細胞(neural stem cells,NSCs)分化的可行性。方法:全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)大鼠BMSCs,倒置相差顯微鏡觀察其形態(tài)特征,MTT法繪制生長曲線,流式細胞儀(flow cytometry,FCM)測定細胞周期并鑒定細胞表面標志物。用80 ng/ml aFGF的無血清DMEM/F12培養(yǎng)液誘導大鼠BMSCs向NSCs分化,鏡下觀察細胞形態(tài)特征,免疫熒光染色方法檢測神經巢蛋白(Nestin)、神經元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)的表達。結果:大鼠BMSCs貼壁生長,呈梭形,多角形。第1、3、5代BMSCs的生長曲線均呈S形,活性無明顯差異。細胞周期顯示94.34%BMSCs處于G0/G1期,有較強的分裂增殖能力。FCM檢測CD29、CD54、CD90表達陽性,CD45表達陰性。誘導6 h后細胞的胞體收縮成橢圓形或球形并伸出細長突起,免疫熒光染色顯示Nestin表達陽性,繼續(xù)誘導發(fā)現(xiàn)雙極和多極細胞增多,誘導6 d后相互連接成網狀,成典型的神經元樣細胞,NSE表達陽性。結論:全骨髓貼壁培養(yǎng)法能培養(yǎng)出高純度的BMSCs,細胞生長穩(wěn)定、增殖快、可多次傳代,具有干細胞特性。經aFGF誘導后具有向NSCs分化的潛能,NSCs能進一步分化為神經元樣細胞。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院燒傷整形外科;重慶市急救醫(yī)療中心整形顱頜面外科;
【關鍵詞】： 骨髓間充質干細胞 全骨髓貼壁培養(yǎng)法 誘導分化 神經干細胞 酸性成纖維細胞生長因子
【基金】：重慶市科委自然科學基金資助項目(編號:2010BB5394)
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是骨髓細胞中的非造血干細胞,為成纖維樣細胞,有較強的可塑性,不僅能被誘導分化為骨、軟骨、脂肪等中胚層細胞,還能在特定培養(yǎng)條件下分化為神經干細胞(neural stem cells,NSCs)、神經元等[1-2]。BMSCs取材方便,能

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本文編號：1097610