本文關(guān)鍵詞：Jagged1過表達促進老齡大鼠來源的內(nèi)皮祖細胞向成熟內(nèi)皮細胞分化

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【摘要】：目的:探討上調(diào)Jagged1表達對內(nèi)皮培養(yǎng)條件下老齡大鼠來源的內(nèi)皮祖細胞(EPC)向內(nèi)皮細胞分化的影響。方法:脫臼處死1～2月齡和19～26月齡SD大鼠,PBS沖洗股骨和脛骨骨髓,Ficoll密度梯度離心分離單個核細胞,應(yīng)用含10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基以差速貼壁法進行體外培養(yǎng),DiI-ac-LDL與FITC-UEA-1熒光雙染進行EPC特性鑒定。實驗分為4組:對照組、PIRES2-EGFP轉(zhuǎn)染組、PIRES2-EGFP-Jagged1轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染的年輕大鼠來源EPC組。熒光顯微鏡下計數(shù)GFP陽性細胞數(shù)并計算轉(zhuǎn)染效率;免疫熒光、RT-PCR和Western blotting檢測Jagged1 mRNA和蛋白、von Willebrand因子(vWF)及血管內(nèi)皮生長因子激酶插入?yún)^(qū)受體(KDR)mRNA表達,體外血管生成實驗檢測EPC的血管形成能力。結(jié)果:轉(zhuǎn)染后Jagged1在EGFP-Jagged1組表達較對照組顯著增強(P0.01);Jagged1過表達顯著促進老齡大鼠EPC vWF與KDR mRNA表達(P0.01)和體外血管生成能力(P0.01);vWF與KDR mRNA表達以及體外血管生成能力在Jagged1轉(zhuǎn)染組與年輕大鼠EPC組間未見有顯著差別。結(jié)論:Jagged1過表達促進內(nèi)皮培養(yǎng)條件下老齡大鼠來源EPC向成熟內(nèi)皮細胞分化。
【作者單位】： 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院檢驗科云南省干細胞與組織工程中心;第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍心血管疾病研究所;第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院電磁輻射生物學(xué)效應(yīng)研究所;
【關(guān)鍵詞】： Jagged蛋白 內(nèi)皮祖細胞 血管發(fā)生 衰老
【基金】：“973”基礎(chǔ)研究規(guī)劃項目(No.2012CB518100) 國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81170316)
【分類號】：R329
【正文快照】： 內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cell,EPC)具有成體細胞類似的衰老生物學(xué)特性已為諸多文獻證實[1-2]。我們前期研究表明,EPC修復(fù)損傷血管具有年齡依賴特性,即年輕大鼠來源EPC較老齡大鼠來源者具有更好的增殖遷移和向內(nèi)皮細胞(endothelialcell,EC)分化能力[3]。Notch信號

【參考文獻】

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本文編號：1095661