本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)新方法

  更多相關(guān)文章： 間充質(zhì)干細(xì)胞 骨髓加骨片法 小鼠

【摘要】：本研究旨在建立一種方便、快捷、有效體外分離培養(yǎng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)的方法。在無(wú)菌條件下取小鼠股骨、脛骨,分別用全骨髓貼壁法、骨片消化法、骨髓加骨片法分離小鼠MSC,比較MSC集落出現(xiàn)時(shí)間、大小及數(shù)量;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞免疫表型,并進(jìn)行MSC成骨、成脂分化鑒定。結(jié)果表明,骨髓加骨片法出現(xiàn)的集落時(shí)間最早,集落數(shù)量最多,第4天集落數(shù)為20±4個(gè);骨片消化法為11.5±2.5個(gè);全骨髓貼壁法最少,為9.5±1.5個(gè);到第3代時(shí),骨髓加骨片法獲得細(xì)胞數(shù)量最多,是全骨髓貼壁法和骨片消化法的2倍;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,獲得的細(xì)胞高表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)志之一Sca-1,高表達(dá)CD44、CD29,不表達(dá)白細(xì)胞表面抗原CD45和內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志CD31等;所分離的MSC在成骨誘導(dǎo)體系和成脂誘導(dǎo)體系中能分別向成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分化,具有典型的MSC特性。結(jié)論:骨髓加骨片法是一種方便、快捷、有效的小鼠骨髓MSC分離方法。
【作者單位】： 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院口腔科;中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 間充質(zhì)干細(xì)胞 骨髓加骨片法 小鼠
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃"973計(jì)劃"(編號(hào)2010CB529904) "863"重大專項(xiàng)(編號(hào)2011AA020114) 國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號(hào)81271936,81070393,81170523,81170461,31170926)
【分類號(hào)】：R329.28
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)是骨髓中除造血干細(xì)胞外另一重要的干細(xì)胞。MSC具有自我更新、多向分化、免疫調(diào)控和支持造血的能力,而且來(lái)源廣泛,容易在體外培養(yǎng)和擴(kuò)增,目前已經(jīng)應(yīng)用于臨床并顯示了良好的治療效果[1-3]。雖然MSC臨床應(yīng)用廣泛,但許多關(guān)鍵問(wèn)題如免疫

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