本文關(guān)鍵詞：初級纖毛介導(dǎo)的Shh信號對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的影響

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【摘要】：目的探討初級纖毛介導(dǎo)的Sonic hedgehog(Shh)信號對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的影響。方法全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠MSCs。實(shí)驗(yàn)分為白藜蘆醇正常培養(yǎng)組、白藜蘆醇誘導(dǎo)組、Smoothened(Smo)激動(dòng)劑SAG組、Smo抑制劑環(huán)巴明組,分別給予相應(yīng)的藥物處理。倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài);免疫熒光法檢測各組細(xì)胞初級纖毛及Shh信號通路相關(guān)蛋白[Ac-Tu、Patched(Ptc)、Smo、Gli1]的表達(dá);RT-PCR檢測各組細(xì)胞Smo、Gli1mRNA的表達(dá);蛋白質(zhì)印跡法檢測各組細(xì)胞Smo和Gli1蛋白的表達(dá)。結(jié)果正常培養(yǎng)的大鼠MSCs不表達(dá)初級纖毛。經(jīng)過預(yù)誘導(dǎo)或饑餓處理24h后,MSCs表達(dá)初級纖毛及Ptc、Smo和Gli1蛋白,其中Smo和Gli1蛋白位于胞質(zhì),Ptc蛋白位于初級纖毛。正常培養(yǎng)時(shí),白藜蘆醇不能促使Smo移位及MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化。當(dāng)MSCs表達(dá)初級纖毛時(shí),白藜蘆醇及SAG可使Smo從胞質(zhì)進(jìn)入初級纖毛,同時(shí)伴隨MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化及Smo、Gli1mRNA和蛋白表達(dá)水平的增加(P0.05);加入抑制劑環(huán)巴明后,Smo仍主要表達(dá)于胞質(zhì),Smo、Gli1mRNA和蛋白的表達(dá)水平降低(P0.05),MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化受抑制。結(jié)論 MSCs表達(dá)初級纖毛并存在Shh信號,初級纖毛介導(dǎo)的Shh信號參與調(diào)控大鼠MSCs的神經(jīng)元樣細(xì)胞分化。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： Shh信號 初級纖毛 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)元樣細(xì)胞 細(xì)胞分化
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81071119) 重慶市衛(wèi)生局科研基金(2009-2-359)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓基質(zhì)細(xì)胞(marrow stromal cells,MSCs)屬多能干細(xì)胞,具有自我更新和多向分化潛能,在一定條件下可被誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞[1-2]。目前使用的誘導(dǎo)劑大多為抗氧化劑和生長因子[3]。本課題組在前期實(shí)驗(yàn)中業(yè)已證實(shí)天然抗氧化劑白藜蘆醇可誘導(dǎo)MSCs分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞,并且在

【參考文獻(xiàn)】

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3 黃家貴;沈長波;劉舒;徐蘭;楊琴;;白藜蘆醇誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)元樣細(xì)胞分化伴Shh信號激活[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

【共引文獻(xiàn)】

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3 黃濤;韓富;張志強(qiáng);謝海濤;沈有碧;譚齊家;謝才軍;伍世表;隋立森;陳捷晗;;Notch1信號通路對丹參誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年09期

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【二級參考文獻(xiàn)】

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1 楊軍,董為偉,賈延R，

本文編號：1075002