本文關(guān)鍵詞：整合缺陷型重組慢病毒載體構(gòu)建及HCV重組假型慢病毒顆粒的制備與性狀分析

  更多相關(guān)文章： 整合缺陷 慢病毒載體 丙型肝炎病毒 假型顆粒

【摘要】：為提高慢病毒載體應(yīng)用的安全性及改進(jìn)HCV新型顆粒疫苗的制備,首先對(duì)傳統(tǒng)的慢病毒三質(zhì)粒系統(tǒng)進(jìn)行改造:將包裝質(zhì)粒pHR’CMVΔR8.2改造成整合缺陷型的包裝質(zhì)粒pHR’CMVΔR8.2D64E,并在體外感染實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其整合缺陷性;將轉(zhuǎn)移質(zhì)粒中的報(bào)告基因GFP替換成HCV的NS3基因,選用表達(dá)3種亞型(1a、1b、2a)HCV包膜E1E2的包膜質(zhì)粒,用改造后的三質(zhì)粒系統(tǒng)制備了3種亞型(1a,1b,2a)的假型丙型肝炎病毒(HCV)整合缺陷型慢病毒顆粒,并用Western blot方法確定了顆粒上包膜蛋白的表達(dá),通過(guò)電鏡可觀察到濃縮后的HCV慢病毒顆粒結(jié)構(gòu),HCV慢病毒顆粒感染Huh7細(xì)胞后可觀察到轉(zhuǎn)基因NS3的表達(dá)。為安全高效的慢病毒載體的應(yīng)用及HCV假型顆粒疫苗研發(fā)提供了新的技術(shù)路線。
【作者單位】： 衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)病毒與病毒病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;煤炭總醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 整合缺陷 慢病毒載體 丙型肝炎病毒 假型顆粒
【基金】：十一五傳染病重大專項(xiàng)(2009ZX10004-705,-715)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 慢病毒載體能夠容納多達(dá)8kb的外源基因[1],在體內(nèi)體外均能高效轉(zhuǎn)導(dǎo)包括DC細(xì)胞在內(nèi)廣泛的細(xì)胞類型[2],能夠整合外源基因到宿主基因組中引起持續(xù)的基因表達(dá),且沒(méi)有預(yù)存免疫[3],載體骨架的免疫原性弱[4-5]。由于這些獨(dú)特的特征,慢病毒載體作為一種有效的基因轉(zhuǎn)移工具,逐漸應(yīng)用于

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張柯;譚文杰;鄧瑤;李津;吳小兵;阮力;;三種丙型肝炎包膜感染性假病毒顆粒的制備及初步應(yīng)用研究[J];病毒學(xué)報(bào);2008年04期

2 管潔;王秀平;鄧瑤;周為民;吳小兵;譚文杰;;含分泌型螢光素酶和綠色熒光蛋白雙報(bào)告基因的慢病毒載體的制備與表達(dá)分析[J];生物技術(shù)通訊;2011年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 鄧瑤;張柯;陳紅;劉紅梅;吳小兵;阮力;譚文杰;;表達(dá)HCV包膜蛋白的兩種重組腺相關(guān)病毒疫苗的制備及免疫原性分析[J];病毒學(xué)報(bào);2009年04期

2 王文;陳紅;譚文杰;鄧瑤;王敏;劉源;殷霄;張柯;管潔;周劍芳;舒躍龍;阮力;;表達(dá)人高致病性禽流感病毒H5N1(安徽株)結(jié)構(gòu)基因的DNA疫苗在小鼠中誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答分析[J];病毒學(xué)報(bào);2010年03期

3 王文;陳紅;鄧瑤;楊揚(yáng);殷霄;王敏;周劍芳;舒躍龍;阮力;譚文杰;;含H5N1多個(gè)結(jié)構(gòu)抗原的DNA疫苗與重組痘苗病毒疫苗聯(lián)合免疫小鼠可明顯增強(qiáng)免疫原性[J];病毒學(xué)報(bào);2011年06期

4 陳娜;劉葉紅;劉敏;;HCV細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];傳染病信息;2012年05期

5 盧莎;鄧瑤;沈曉玲;管潔;周為民;王岳;阮力;譚文杰;;嵌合中國(guó)分離株基因的丙型肝炎病毒(1b/2a)細(xì)胞培養(yǎng)模型的建立[J];生物技術(shù)通訊;2009年04期

6 管潔;王秀平;鄧瑤;周為民;吳小兵;譚文杰;;含分泌型螢光素酶和綠色熒光蛋白雙報(bào)告基因的慢病毒載體的制備與表達(dá)分析[J];生物技術(shù)通訊;2011年02期

7 徐敏;楊曉紅;陳龍;李么明;葉靜;陳煥春;畢丁仁;曹勝波;;慢病毒載體介導(dǎo)的西尼羅河病毒prME蛋白的表達(dá)[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2010年08期

8 張振杰;崔麗娜;張?jiān)i;趙協(xié);王亮;常維山;;假型病毒制備與應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2010年06期

9 羅桂飛;李喜芳;黃志文;張文軍;;人工靶向性M1GS核酶胞內(nèi)抗HCV活性的研究[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2013年15期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 徐敏;楊曉紅;陳龍;葉靜;李么明;陳煥春;曹勝波;;慢病毒載體介導(dǎo)表達(dá)西尼羅河病毒prME蛋白[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第二次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 賀番;基于偽型病毒的豬瘟中和抗體檢測(cè)方法的初步建立及豬瘟病毒E2蛋白的細(xì)胞定位研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 徐敏;西尼羅河病毒重組桿狀病毒和重組慢病毒的構(gòu)建[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 李龍;HCV＋表位抗原的恒河猴免疫學(xué)效果評(píng)價(jià)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

3 盧莎;嵌合1a與1b亞型包膜蛋白基因HCV細(xì)胞培養(yǎng)模型的初步研究[D];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院;2009年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 畢勝利,白憲鶴,叢勉爾,田厚文,孫得貴,H.S.Margolis,劉崇柏;中國(guó)人丙型肝炎病毒基因組的一級(jí)結(jié)構(gòu)及其變異[J];病毒學(xué)報(bào);1993年02期

2 閆克夏;譚文杰;張相民;王慧娟;李巖;阮力;;SARS-CoV假病毒中和試驗(yàn)技術(shù)的建立及評(píng)價(jià)[J];病毒學(xué)報(bào);2007年06期

3 張柯;譚文杰;鄧瑤;李津;吳小兵;阮力;;三種丙型肝炎包膜感染性假病毒顆粒的制備及初步應(yīng)用研究[J];病毒學(xué)報(bào);2008年04期

4 付昕陽(yáng);王剛;田文洪;陳素云;董小巖;吳小兵;譚萬(wàn)龍;;雙螢光素酶共表達(dá)載體構(gòu)建及特性研究[J];病毒學(xué)報(bào);2010年04期

5 田文洪;王剛;羅順濤;董小巖;付昕陽(yáng);譚文杰;吳小兵;;體外實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)水動(dòng)力注射分泌型熒光素酶基因的表達(dá)[J];生物工程學(xué)報(bào);2009年10期

6 張柯;阮力;譚文杰;;抗HCV中和抗體的研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年03期

7 ;丙型肝炎防治指南[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年09期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 闞全程;余祖江;雷延昌;楊東亮;郝連杰;;人工構(gòu)建含丙型肝炎病毒核糖體插入位點(diǎn)的雙順?lè)醋颖磉_(dá)載體[J];世界華人消化雜志;2003年10期

2 張健,劉妍,成軍,王琳,邵清,梁耀東,劉敏;丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP7的克隆[J];世界華人消化雜志;2004年01期

3 陳秋莉,戚中田;DC-SIGN和L-SIGN與丙型肝炎病毒感染[J];生命的化學(xué);2005年04期

4 許小亮,李君武;丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3蛋白酶抑制劑的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2005年10期

5 呂琪;鄭義;宋林立;李忠新;李瑜珍;周小梅;;DNA微點(diǎn)陣分析丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS4B對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)的影響[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2006年02期

6 彭徐;;慢病毒載體研究進(jìn)展[J];西昌學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年03期

7 楊振;;丙型肝炎病毒基因結(jié)構(gòu)與功能分析[J];中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2009年01期

8 葉禮紅;舒曉春;鄔偉民;魯紅云;孟曉軍;孫遼;;TIEG特異的siRNA慢病毒載體的構(gòu)建及鑒定[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2009年17期

9 左雨娜;焦德敏;于慧慧;張鑄業(yè);李宙陽(yáng);袁軍;劉愛(ài)和;王彥刈;;一種簡(jiǎn)單的慢病毒載體介導(dǎo)的同時(shí)沉默雙基因的方法[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2010年03期

10 劉燕;彭聿平;黃彥;黃慧偉;邱一華;;miR-TH克隆及慢病毒載體的構(gòu)建[J];南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王海彬;;雌激素相關(guān)受體α基因超表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會(huì)成立十周年論文匯編[C];2011年

2 高書穎;于潔;;攜帶hTERT基因的重組慢病毒載體的構(gòu)建及鑒定[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

3 龔作炯;;丙型肝炎病毒的病毒學(xué)及抗病毒靶位[A];全國(guó)第3屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)傳染病專業(yè)委員會(huì)第2屆委員會(huì)議論文匯編[C];2010年

4 劉競(jìng);余鋒;桂嶸;李昕;蔣鐵斌;王二華;李穎;王成紅;唐雪元;陳方平;;Survivin shRNA慢病毒載體構(gòu)建[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

5 宋達(dá)疆;黃曉元;任利成;楊興華;肖目張;王雙;;TREM-1基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及功能初步檢測(cè)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

6 曾東風(fēng);陳幸華;孔佩艷;徐葳;張曦;;PINCH-1基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及鑒定[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

7 朱研;譚朝霞;范焱;張長(zhǎng)江;王小紅;;丙型肝炎病毒動(dòng)態(tài)準(zhǔn)種優(yōu)勢(shì)株的確定[A];全國(guó)第3屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)傳染病專業(yè)委員會(huì)第2屆委員會(huì)議論文匯編[C];2010年

8 竇曉光;李智偉;王兆荃;;不同基因型丙型肝炎病毒NS5a高免疫源區(qū)基因在大腸桿菌中的表達(dá)及其抗原性檢測(cè)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)感染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

9 王敏;韓紅星;蔣小玲;陸堅(jiān);徐六妹;;HCV RNA定量檢測(cè)與基因分型的研究[A];第一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

10 鄧慶麗;王巍;黃開紅;邵靜;黃志明;;形成丙型肝炎病毒負(fù)鏈復(fù)制體的相關(guān)蛋白的分析[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 記者 王菲 胡江;新疆科學(xué)家“破解”綿羊轉(zhuǎn)基因技術(shù)“密碼”[N];新疆科技報(bào)(漢);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 郝林琳;慢病毒介導(dǎo)的生長(zhǎng)抑素siRNA對(duì)小鼠生長(zhǎng)軸激素的影響[D];吉林大學(xué);2009年

2 錢建平;攜帶綠色熒光蛋白基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染幾種皮膚結(jié)構(gòu)重要細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

3 李衛(wèi)華;表達(dá)HCV-NS3抗原的重組腺病毒載體疫苗的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

4 胡巍;丙型肝炎病毒NS3蛋白酶及抑制肽研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

5 鄭義;丙型肝炎病毒NS4B蛋白的功能[D];武漢大學(xué);2005年

6 許信剛;逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的丙型肝炎病毒（HCV）囊膜蛋白基因的表達(dá)及抗HCV中和抗體的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2005年

7 葉力;丙型肝炎病毒基因組復(fù)制模板選擇性的研究[D];武漢大學(xué);2005年

8 徐世永;慢病毒載體法高效轉(zhuǎn)基因雞制備技術(shù)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

9 劉美玲;睪丸特異表達(dá)基因LM23的性質(zhì)和功能研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

10 廖慶姣;丙型肝炎病毒核心蛋白和NS5A蛋白對(duì)NF-κB的激活研究[D];武漢大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魏衍全;慢病毒介導(dǎo)shRNA穩(wěn)定持續(xù)抑制口蹄疫病毒增殖的兩類細(xì)胞系的建立[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

2 張國(guó)峰;慢病毒載體介導(dǎo)的RNAi抑制牛整聯(lián)蛋白亞基αv基因表達(dá)的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

3 王棟;編碼t-PA基因慢病毒載體的構(gòu)建及其制備體系的建立[D];山東師范大學(xué);2009年

4 楊馨;NR2B慢病毒載體構(gòu)建和病毒生產(chǎn)[D];華東師范大學(xué);2006年

5 王星星;重組hTERT啟動(dòng)子啟動(dòng)CD基因慢病毒載體構(gòu)建及電穿孔法包裝慢病毒顆粒[D];重慶大學(xué);2009年

6 王超;雙啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的LfcinB基因慢病毒載體的構(gòu)建及體外對(duì)SKOV3細(xì)胞作用的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

7 蘇一鳴;構(gòu)建過(guò)表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子β亞基基因的慢病毒載體的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

8 于淼;小鼠DND1慢病毒載體的構(gòu)建及病毒生產(chǎn)[D];湖南師范大學(xué);2010年

9 李朋;PR1-HLA-A*0201單鏈三聚體慢病毒載體的構(gòu)建及初步研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2011年

10 李玉恒;CIRP過(guò)表達(dá)和干擾慢病毒載體的構(gòu)建與分析[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：1070808