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FCCP對(duì)P19細(xì)胞向心肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-10-20 11:04

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【摘要】:目的:探討羰基-氰-對(duì)-三氟甲氧基本腙(carbonyl cyanide p-trifluoromethoxyphenylhydrazone,FCCP)對(duì)P19細(xì)胞向心肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響。方法:在P19細(xì)胞向心肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的過(guò)程中加入5μmol/L的FCCP,同時(shí)設(shè)立陰性對(duì)照組,顯微鏡觀察分化過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)P19細(xì)胞形態(tài)的變化,并采用real-time PCR和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測(cè)GATA4、NKX2.5及cTnT在分化過(guò)程中的mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:FCCP處理組P19細(xì)胞形成的胚胎樣小體較對(duì)照組體積小,結(jié)構(gòu)較松散,形態(tài)不均一。在整個(gè)分化過(guò)程中,FCCP處理組GATA4、NKX2.5及cTnT基因均有表達(dá),但整個(gè)動(dòng)態(tài)表達(dá)過(guò)程較對(duì)照組延遲;Western blot結(jié)果顯示,FCCP處理組GATA4、NKX2.5蛋白在第5、7、9天的表達(dá)量均較對(duì)照組低;在第11天,兩組間GATA4蛋白的表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而NKX2.5在FCCP處理組的表達(dá)量仍低于對(duì)照組。FCCP處理組和對(duì)照組cTnT蛋白在分化第5、7天的表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而在第9、11天cTnT蛋白表達(dá)量FCCP組均較對(duì)照組低。結(jié)論:FCCP可抑制P19細(xì)胞向心肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的進(jìn)程。
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟科;南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院兒童保健科;
【關(guān)鍵詞】心肌細(xì)胞 P細(xì)胞 FCCP 分化 線粒體
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81070138) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2010582) 江蘇省人才基金(WSN-020) 江蘇省六大人才高峰計(jì)劃(2009029)
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: 脊椎動(dòng)物的心臟是胚胎發(fā)育過(guò)程中最早形成并行使功能的器官,它的發(fā)生需經(jīng)過(guò)一系列重要的形態(tài)發(fā)生事件,包括細(xì)胞決定、細(xì)胞遷移和細(xì)胞分化等,這些過(guò)程的正常進(jìn)行才能保證胚胎心臟的協(xié)調(diào)發(fā)育,稍有異常都有可能影響心臟的發(fā)育導(dǎo)致先天性心臟病的發(fā)生[1]。盡管從基因和分子水平研

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