本文關(guān)鍵詞：軟骨細(xì)胞外基質(zhì)對臍帶Wharton膠間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)性狀的作用

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【摘要】：[目的]探討軟骨細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境對源于人臍帶Wharton膠的間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響,觀察該微環(huán)境促進(jìn)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞方向分化的潛能。[方法]①取3%(w/v)豬關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)和2.4%(w/v)海藻酸鹽為原料,按體積比1∶1的比例充分混合,將其用帶16 G針頭的1 ml注射器勻速滴入氯化鈣溶液制作軟骨細(xì)胞外基質(zhì)/海藻酸鹽混合凝膠微球,通過掃描電鏡觀察該微球內(nèi)部結(jié)構(gòu)。②將人臍帶Wharton膠中間質(zhì)干細(xì)胞(WJMSCs)混于軟骨細(xì)胞外基質(zhì)/海藻酸混合液,滴入氯化鈣溶液形成復(fù)合干細(xì)胞的混合凝膠微球進(jìn)行培養(yǎng),設(shè)為實(shí)驗(yàn)組;同理WJMSCs混合于單純藻酸鹽凝膠并形成微球作為對照組。③通過掃描電鏡和FDA-PI染色觀察上述兩組微球內(nèi)細(xì)胞的生長粘附情況,體外培養(yǎng)4周,經(jīng)組織學(xué)和DNA測定觀察干細(xì)胞的表型及增殖情況。[結(jié)果]①構(gòu)建的軟骨細(xì)胞外基質(zhì)/海藻酸鹽混合凝膠微球呈半透明乳白色,內(nèi)部具有較多不規(guī)則的孔隙結(jié)構(gòu),具有三維立體培養(yǎng)細(xì)胞的環(huán)境特點(diǎn)。②比較實(shí)驗(yàn)組和對照組不同細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間段細(xì)胞增殖量,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖率高于對照組,第28 d時(shí)兩組細(xì)胞DNA含量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P㩳0.05)。③實(shí)驗(yàn)組中細(xì)胞呈圓形或橢圓形,形成明顯的軟骨陷窩樣的結(jié)構(gòu),有大量細(xì)胞外基質(zhì)分泌,對照組中細(xì)胞呈圓形,陷窩樣的結(jié)構(gòu)不明顯。④組織學(xué)染色觀察發(fā)現(xiàn):實(shí)驗(yàn)組中培養(yǎng)的干細(xì)胞明顯有向軟骨細(xì)胞方向分化的趨勢。[結(jié)論]軟骨細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境不僅利于人臍帶Wharton膠中間質(zhì)干細(xì)胞的增殖,而且具有將WJMSCs向軟骨細(xì)胞方向誘導(dǎo)分化的潛能。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院骨科研究所;黑龍江佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 臍帶Wharton膠間充質(zhì)干細(xì)胞 軟骨細(xì)胞外基質(zhì) 藻酸鹽 軟骨組織工程
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:30973047,81000810,81071458) 863計(jì)劃項(xiàng)目(編號:2102AA020502)
【分類號】：R329
【正文快照】： 雖然自體軟骨細(xì)胞是軟骨組織工程的最佳種子細(xì)胞,然而因其來源和增殖潛力有限,且培養(yǎng)過程中容易失去軟骨細(xì)胞表型,形成纖維樣細(xì)胞[1]等問題,限制了其應(yīng)用。因此具有多向分化功能的干細(xì)胞成了組織工程軟骨種子細(xì)胞研究開發(fā)的目標(biāo),然而如何搭建將干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞方向分化的環(huán)境

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【相似文獻(xiàn)】

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4 蔣革;文相賢;金美，

本文編號：1063202