本文關(guān)鍵詞：抗微小隱孢子蟲TSP6蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

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【摘要】：目的在大腸埃希菌中可溶性表達(dá)微小隱孢子蟲TSP6抗原分子,并以其純化產(chǎn)物為抗原,利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)抗TSP6單克隆抗體(McAb)。方法將pGEX-4T-1-TSP6重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21(DE3),經(jīng)0.1mmol/LIPTG誘導(dǎo)表達(dá)后超聲破菌,獲得可溶性表達(dá)產(chǎn)物,通過Gluthathione-Sepharose 4B磁珠純化蛋白質(zhì),以純化的重組TSP6為抗原免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞融合,用ELISA和有限稀釋法篩選分泌高滴度McAb的雜交瘤細(xì)胞株,測定其免疫球蛋白亞類及效價,Western blot分析其特異性。結(jié)果篩選出2株雜交瘤細(xì)胞能穩(wěn)定分泌抗TSP6單克隆抗體,經(jīng)鑒定均為IgG1。Western blot分析顯示,制備的單抗均能與相應(yīng)的重組蛋白特異性結(jié)合。結(jié)論制備的抗TSP6雜交瘤細(xì)胞株能分泌高特異性的McAb。
【作者單位】： 人獸共患病教育部重點實驗室吉林大學(xué)人獸共患病研究所;吉林大學(xué)第一醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 微小隱孢子蟲 TSP抗原 可溶性表達(dá) 單克隆抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.31072125)
【分類號】：R392
【正文快照】： 微小隱孢子蟲(Cryptosporidium parvum)是一種能引起世界范圍內(nèi)人和動物腹瀉的重要寄生性原蟲,由于缺少療效穩(wěn)定的抗蟲藥物和公認(rèn)的預(yù)防措施,目前隱孢子蟲病的防治依舊是世界性的難題。尋找有效的疫苗候選抗原是控制隱孢子蟲病的關(guān)鍵。微小隱孢子蟲子孢子與宿主腸上皮細(xì)胞間

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1 劉建東;劉思國;王春來;宮強(qiáng);王勇;遲磊;趙昆;;基因免疫制備牛分枝桿菌MPB64抗原單克隆抗體[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2007年11期

2 吳曉軍;張娟;陳衛(wèi);欒立標(biāo);王e，

本文編號：1047684