本文關鍵詞：直接鋪種結合改良組織塊培養(yǎng)法可有效分離人骨髓中的間充質干細胞

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【摘要】：骨髓是間充質干細胞(MSC)的重要來源。研究顯示,標準密度梯度離心法分離骨髓MSC的效率不高,骨髓小粒是造成該法低效的原因。通過組織塊法分離骨髓小粒,再結合標準法,可從單份骨髓標本分離獲得更多MSC,然而這種方法費時費力。本研究探求分離骨髓MSC更簡單、更有效的方法。收集7例正常人骨髓標本,低速離心沉降,用改良組織塊法培養(yǎng)漂浮在液面上層骨髓小粒中的MSC,用直接鋪種法培養(yǎng)沉降在底層的MSC。然后對MSC進行免疫表型和分化能力鑒定。結果表明:在7例標本中,有3例骨髓小粒漂浮在液面上層,其余骨髓細胞包括部分小粒沉降在底層;漂浮小粒中的MSC可用改良組織塊法獲得,沉降在底層的MSC可用直接鋪種法獲得。分離的MSC傳代3次后不表達CD45、CD34,表達CD105、CD73、CD44、CD90、CD49e,能向軟骨和脂肪細胞分化。結論:以直接鋪種法為主、改良組織塊培養(yǎng)法為輔,可簡單、高效地分離人骨髓中MSC。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院血液病醫(yī)院血液學研究所實驗血液學國家重點實驗室;遼寧醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院血液科;
【關鍵詞】： 間充質干細胞 骨髓 直接鋪種法 改良組織塊培養(yǎng)法
【基金】：國家自然科學基金(編號81270575) 天津市自然科學基金(編號11JCYBJC10500,09JCYBJC11000)資助
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓是間充質干細胞(MSC)的主要來源。目前,從人骨髓中分離MSC的方法可分為三種:①先用密度梯度離心法分離單個核細胞(MNC),再培養(yǎng)和擴增得到MSC———即所謂的標準培養(yǎng)法[1-3];②采用全骨髓直接鋪種法[4,5];③用特異性抗體篩選陽性或陰性細胞群,然后進行培養(yǎng)和擴增[5,6]。這

【共引文獻】

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