本文關(guān)鍵詞：CCK-8法與FACS對抗CD3抗體誘導(dǎo)小鼠Treg細(xì)胞免疫抑制作用的比較

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【摘要】：用非放射性同位素方法檢測抗CD3抗體誘導(dǎo)的小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)對效應(yīng)性T細(xì)胞(Teff)增殖的抑制作用。本實(shí)驗用絲裂霉素C處理脾細(xì)胞獲得抗原遞呈細(xì)胞(APC),用免疫磁珠分離BALB/c小鼠脾臟CD4~+CD25~+的Treg和CD4~+CD25~-的Teff,二者按1:2比例與APC共培養(yǎng),并加入anti-CD3抗體刺激3 d,加CCK-8孵育檢測細(xì)胞增殖。另外,CFSE標(biāo)記Teff,與Treg共同培養(yǎng),加入anti-CD3抗體刺激3 d,流式細(xì)胞儀分析Treg對Teff增殖的抑制作用。流式分析表明,0.1 mg/L、1 mg/L的anti-CD3抗體均能明顯促進(jìn)Teff細(xì)胞增殖,加Treg細(xì)胞能明顯減低細(xì)胞增殖的比例和減少增殖的代數(shù)。anti-CD3抗體劑量增加到1 mg/L,Teff的增殖較0.1 mg/L劑量刺激時沒有明顯改變,但Treg的抑制功能減弱了。CCK-8法與流式檢測得出的結(jié)果一致。CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)(FACS)均可以用來檢測Treg細(xì)胞的免疫抑制作用,并且采用0.1 mg/L anti-CD3抗體刺激,對Treg細(xì)胞免疫抑制作用的檢測效果更好。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院藥學(xué)部;
【關(guān)鍵詞】： 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 anti-CD 免疫抑制 流式細(xì)胞儀 CCK-
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(30801413;81073119)
【分類號】：R392
【正文快照】： CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulato-ryT。ells，，Treg)是免疫系統(tǒng)一群重要的執(zhí)行細(xì)胞，可通過維持自身耐受、抑制免疫細(xì)胞活化而改善自身免疫性疾病和炎癥等〔’〕;但過強(qiáng)又能抑制腫瘤免疫，促進(jìn)腫瘤生長和侵襲[z.’〕。具有免疫調(diào)節(jié)功能的CD4+CD25+T細(xì)胞于1995年由Sakagueh

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4 王弘s

本文編號：1037302