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肝螺桿菌甲基基團(tuán)趨化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白多克隆抗體的制備及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-10-14 11:26

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【摘要】:目的制備肝螺桿菌甲基基團(tuán)趨化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白多克隆抗體。方法將我室保種的重組質(zhì)粒pET22b+/MCP轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)BL21(DE3),IPTG誘導(dǎo)表達(dá)His-rhMCP融合蛋白,將表達(dá)的融合蛋白純化后,免疫家兔制備抗體,間接ELISA法測定抗體效價(jià),以制備的菌體外膜蛋白(肝螺桿菌、膽型螺桿菌及幽門螺桿菌)采用Western blot鑒定抗體的特異性。結(jié)果大腸桿菌成功表達(dá)His-rhMCP融合蛋白,ELISA法檢測抗體的效價(jià)達(dá)到1∶32000,Western blot檢測結(jié)果顯示抗體可與肝螺桿菌菌體外膜蛋白及His-rhMCP特異結(jié)合。結(jié)論制備了高效價(jià)、高特異性的rhMCP抗體,為進(jìn)一步研究肝螺桿菌的流行病學(xué)奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院胸心血管外科;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院消化內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】肝螺桿菌 甲基基團(tuán)趨化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白 抗體制備
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30973404)~~
【分類號】:R378
【正文快照】: 肝螺桿菌是從A/JCr小鼠肝臟分離出一種新型腸肝螺桿菌屬。該菌在多種宿主腸、肝內(nèi)定植,導(dǎo)致慢性肝炎、盲結(jié)腸炎及膽石癥[1],在易感品系小鼠(如A/JCr小鼠)可致肝癌及結(jié)腸癌[2]。多項(xiàng)研究表明,實(shí)驗(yàn)室多個(gè)品系SPF小鼠均有很高的螺桿菌屬細(xì)菌感染率,肝螺桿菌的感染率達(dá)42%~59%[3]

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本文編號:1030813

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