本文關(guān)鍵詞：利用人免疫球蛋白構(gòu)建免疫磁珠富集金葡菌條件優(yōu)化

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【摘要】：利用人免疫球蛋白制備富集金黃色葡萄球菌的免疫磁珠及優(yōu)化條件;利用化學(xué)鍵法制備免疫磁珠,并用矩陣法和單因素法優(yōu)化免疫磁珠制備條件,通過磁珠對(duì)抗體飽和吸附量及加入量相關(guān)性評(píng)價(jià)磁珠與抗體固定化程度,根據(jù)免疫磁珠的特異性、靈敏性及飽和捕捉量來考察IMBS.aureus對(duì)金葡菌的富集能力;結(jié)果顯示采用MB-M型磁珠,加入質(zhì)量濃度均為5 mg/L的活化劑EDC和NHS,于24℃偶聯(lián)人IgG,24 h得到IMBS.aureus,其飽和吸附量為393.27μg,磁珠與人IgG加入量具有相關(guān)性,IMBS.aureus特異性好、靈敏度高(26 CFU/10 mL),0.2 mL IMBS.aureus飽和捕捉菌液濃度為106CFU/mL;通過優(yōu)化,磁珠裝載人IgG分子的能力提高了5倍,檢測(cè)限提高了4倍,富集金葡菌的效率大大增強(qiáng),成本降低,為人免疫球蛋白磁珠富集和分離金黃色葡萄球菌實(shí)際應(yīng)用創(chuàng)造了條件。
【作者單位】： 廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院;國(guó)家海產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心;渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 金黃色葡萄球菌 免疫磁法 人免疫球蛋白 富集
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30972287) 國(guó)家“十二五”支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2012BAD29B06) 廣東省教育廳及廣東海洋大學(xué)引進(jìn)人才基金項(xiàng)目(0812311) 廣東省科技廳省部級(jí)產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目(2011B090400154)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 金黃色葡萄球菌(簡(jiǎn)稱“金葡菌”)可在各種惡劣環(huán)境下生長(zhǎng),并極易產(chǎn)生毒素(最低致病劑量為1μg/kg[1-3])。雖然目前檢測(cè)金葡菌的方法較多,但是由于常規(guī)檢測(cè)方法在菌濃度較低時(shí)易造成漏檢,多數(shù)免疫學(xué)方法操作復(fù)雜,而靈敏度和準(zhǔn)確性較好的分子學(xué)方法價(jià)格昂貴,需專業(yè)人員操作[4-5

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本文編號(hào)：1021766