本文關(guān)鍵詞：培養(yǎng)條件對小鼠髓源性樹突狀細胞生物特性影響的觀察

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【摘要】：目的:明確GM-CSF濃度、IL-4及細胞起始培養(yǎng)密度對培養(yǎng)的小鼠髓源性DC生物特性的影響。方法:分離小鼠骨髓細胞,用100、20和2ng/mL GM-CSF聯(lián)合或不聯(lián)合IL-4以及起始細胞培養(yǎng)密度為2.5×105和7.5×105 mL-1進行體外誘導(dǎo)DC細胞培養(yǎng),培養(yǎng)7d后收集細胞進行計數(shù),同時用流式細胞儀檢測CD11c+及CD11c+CD80+細胞的比例,并對GM-CSF聯(lián)合或不聯(lián)合IL-4培養(yǎng)的DC細胞吞噬腫瘤細胞的能力進行檢測。此外以混合淋巴細胞反應(yīng)(MLR)檢測培養(yǎng)的DC細胞對淋巴細胞的剌激能力。結(jié)果:2ng/mL GM-CSF擴增的DC細胞為起始培養(yǎng)細胞濃度的0.21±0.05倍,與100ng/mL的0.52±0.10倍(t=10.311,P0.001)及20ng/mL的0.46±0.04倍(t=6.934,P0.001)差異均有統(tǒng)計學意義,但100ng/mL與20ng/mL組之間差異無統(tǒng)計學意義,t=1.333,P=0.152。此外,100ng/mL GM-CSF組CD11c細胞的比例低于低2ng/mL組,t=2.571,P=0.034;但100ng/mL與20ng/mL組差異無統(tǒng)計學意義,t=0.913,P=0.39。在20ng/mL GM-CSF時,IL-4的加入與否對培養(yǎng)的DC細胞擴增、純度、成熟、吞噬及活化淋巴細胞的能力均無影響,起始培養(yǎng)細胞密度可影響細胞的擴增。結(jié)論:小鼠髓源DC細胞的培養(yǎng)中,GM-CSF濃度對細胞的擴增及成熟均很重要,高濃度GM-CSF有利于DC的擴增及成熟,而在GM-CSF為20ng/mL時,IL-4對DC細胞的培養(yǎng)并不是必需的。
【作者單位】： 湖北文理學院醫(yī)學院附屬醫(yī)院腫瘤中心;
【關(guān)鍵詞】： 樹突狀細胞 骨髓 細胞因子 動物 實驗
【基金】：湖北省衛(wèi)生廳青年科技人才項目(QJX2012-40)
【分類號】：R329
【正文快照】： 樹突狀細胞(dendritic cell,DC)是體內(nèi)最有效的專職抗原提呈細胞,在機體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮極為重要的作用,不僅具有免疫剌激作用,還可通過活化誘導(dǎo)免疫抑制性T細胞在維持外周免疫耐受中發(fā)揮重要的作用[1-2]。DC治療方法的研究為腫瘤治療及器官移植等提供了新的研究領(lǐng)域[3]。小鼠

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6 張罕;呂U，

本文編號：1006316