大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)及鑒定
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【摘要】:目的:體外分離、擴(kuò)增培養(yǎng)大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞,并進(jìn)行生物學(xué)特性鑒定,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究提供材料準(zhǔn)備。方法:采用密度梯度離心法和差速貼壁法分離獲得單個(gè)核細(xì)胞,置于特殊培養(yǎng)基EGM-2MV進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),對(duì)細(xì)胞行免疫熒光法檢測(cè)CD34、CD133、VEGFR2的表達(dá)情況,攝取DiI-ac-LDL、結(jié)合FITC-UEA-1雙染色鑒定及細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:剛分離的單個(gè)核細(xì)胞小而圓,誘導(dǎo)培養(yǎng)4d左右細(xì)胞開(kāi)始變大,部分呈梭形或多角形,2周左右呈條索狀排列;細(xì)胞免疫熒光法鑒定CD34、CD133、VEGFR2為陽(yáng)性,細(xì)胞既能吞噬DiI-ac-LDL又能與FITC-UEA-1結(jié)合;細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)可見(jiàn)每個(gè)視野遷移細(xì)胞數(shù)為(16.6±1.05)個(gè)。結(jié)論:通過(guò)密度梯度離心法和差速貼壁法能成功獲取單個(gè)核細(xì)胞,在特定培養(yǎng)基EGM-2MV中培養(yǎng)后可分化成為內(nèi)皮祖細(xì)胞,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了細(xì)胞來(lái)源。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院超聲影像學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 皮祖細(xì)胞 體外分離 密度離心法
【基金】:重慶市教委科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(KJ110320)
【分類(lèi)號(hào)】:R329
【正文快照】: 內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)是一種能夠直接分化成為血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,在損傷、缺血及藥物等因素的刺激下均可以動(dòng)員骨髓中的EPCs進(jìn)入體循環(huán)并在各種趨化因子作用下逐步募集到缺血或者損傷處分化成成熟的內(nèi)皮細(xì)胞,促進(jìn)缺血組織器官的內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)及恢復(fù)血供11-42。所以,EPCs已經(jīng)越
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【相似文獻(xiàn)】
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7 凌均h,
本文編號(hào):1005751
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