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大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細胞的體外分離、培養(yǎng)及鑒定

發(fā)布時間:2017-10-10 10:09

  本文關(guān)鍵詞:大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細胞的體外分離、培養(yǎng)及鑒定


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【摘要】:目的:體外分離、擴增培養(yǎng)大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細胞,并進行生物學特性鑒定,為后續(xù)實驗研究提供材料準備。方法:采用密度梯度離心法和差速貼壁法分離獲得單個核細胞,置于特殊培養(yǎng)基EGM-2MV進行擴增培養(yǎng),對細胞行免疫熒光法檢測CD34、CD133、VEGFR2的表達情況,攝取DiI-ac-LDL、結(jié)合FITC-UEA-1雙染色鑒定及細胞遷移實驗。結(jié)果:剛分離的單個核細胞小而圓,誘導培養(yǎng)4d左右細胞開始變大,部分呈梭形或多角形,2周左右呈條索狀排列;細胞免疫熒光法鑒定CD34、CD133、VEGFR2為陽性,細胞既能吞噬DiI-ac-LDL又能與FITC-UEA-1結(jié)合;細胞遷移實驗可見每個視野遷移細胞數(shù)為(16.6±1.05)個。結(jié)論:通過密度梯度離心法和差速貼壁法能成功獲取單個核細胞,在特定培養(yǎng)基EGM-2MV中培養(yǎng)后可分化成為內(nèi)皮祖細胞,為后續(xù)實驗提供了細胞來源。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院超聲影像學研究所;
【關(guān)鍵詞】皮祖細胞 體外分離 密度離心法
【基金】:重慶市教委科學技術(shù)研究項目(KJ110320)
【分類號】:R329
【正文快照】: 內(nèi)皮祖細胞(EPCs)是一種能夠直接分化成為血管內(nèi)皮細胞的前體細胞,在損傷、缺血及藥物等因素的刺激下均可以動員骨髓中的EPCs進入體循環(huán)并在各種趨化因子作用下逐步募集到缺血或者損傷處分化成成熟的內(nèi)皮細胞,促進缺血組織器官的內(nèi)皮細胞修復及恢復血供11-42。所以,EPCs已經(jīng)越

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7 凌均h,

本文編號:1005751


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