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Ag85B調(diào)節(jié)小鼠髓樣樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟和TSLP介導(dǎo)下TSLPR和OX40L的表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2017-10-06 19:09

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【摘要】:目的:研究抗原85B(Ag85B)體外誘導(dǎo)小鼠未成熟的髓樣樹(shù)突狀細(xì)胞(m DCs)的成熟以及對(duì)胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)介導(dǎo)下m DCs表達(dá)TSLP受體(TSLPR)和OX40L的影響,探究Ag85B抑制哮喘氣道炎癥的可能機(jī)制。方法:應(yīng)用重組小鼠GM-CSF和IL-4體外誘生C57BL/6小鼠未成熟的m DCs,并運(yùn)用免疫磁珠分離的方法純化,采用光鏡和掃描電鏡、流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和細(xì)胞表型鑒定;分別用0、50、100、200μg/L不同濃度的Ag85B或TSLP作用于純化并鑒定后的m DCs,培養(yǎng)24 h,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面分子CD80、CD86、TSLPR和OX40L的表達(dá),選取最佳的Ag85B或TSLP處理濃度。隨后將m DCs隨機(jī)分為空白對(duì)照組、Ag85B處理組、TSLP處理組和Ag85B+TSLP處理組,培養(yǎng)24 h后檢測(cè)m DCs的促炎表面分子TSLPR和OX40L的表達(dá)。結(jié)果:體外誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d,倒置相差顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞表面呈現(xiàn)不規(guī)則樹(shù)突樣突起,掃描電鏡下見(jiàn)細(xì)胞類圓形,表面有少量皺褶和較少分叉的樹(shù)突狀突起,符合未成熟m DCs的形態(tài)學(xué)特點(diǎn);純化后的m DCs表達(dá)表面分子CD11c的細(xì)胞較表達(dá)共刺激分子CD80和CD86的細(xì)胞多,符合未成熟m DCs的表型特征。與空白對(duì)照組比較,50~200μg/L的Ag85B處理組m DCs表達(dá)CD80和CD86的細(xì)胞比率顯著增高(P0.05),表達(dá)TSLPR和OX40L的細(xì)胞比率無(wú)顯著差異。與空白對(duì)照組相比較,50、100和200μg/L濃度的TSLP處理組的m DCs表達(dá)CD80和CD86的細(xì)胞比率均顯著增加(P0.05);與空白對(duì)照組和50μg/L TSLP處理組相比較,100μg/L和200μg/L TSLP處理組的m DCs表達(dá)TSLPR和OX40L的細(xì)胞比率均顯著升高(P0.05)。選取200μg/L作為Ag85B和TSLP的優(yōu)化作用濃度,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ag85B處理組和Ag85B+TSLP處理組的m DCs表達(dá)TSLPR和OX40L的細(xì)胞比率較TSLP處理組均顯著降低(P0.05),與空白對(duì)照組比較差異不顯著。結(jié)論:Ag85B可通過(guò)上調(diào)m DCs表達(dá)共刺激分子CD80和CD86促進(jìn)其成熟,同時(shí)下調(diào)TSLP介導(dǎo)的m DCs表達(dá)促炎表面分子TSLPR和OX40L,推測(cè)Ag85B可能通過(guò)TSLP介導(dǎo)的m DCs途徑抑制氣道炎癥。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)研究生院;廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 廣東省老年醫(yī)學(xué)研究所呼吸內(nèi)科;廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 廣東省老年醫(yī)學(xué)研究所醫(yī)學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】抗原B 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素 髓樣樹(shù)突狀細(xì)胞 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體 OXL
【基金】:廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2014J4100040) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.S2011010003664) 廣州市健康醫(yī)療協(xié)同創(chuàng)新重大專項(xiàng)基金(No.201400000002) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013B031800026)
【分類號(hào)】:R562.25
【正文快照】: 樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)分為兩類:髓樣樹(shù)突狀細(xì)胞(myeloid dendritic cells,m DCs),由骨髓中的髓樣前體細(xì)胞分化而來(lái),表達(dá)特異性的標(biāo)記物CD11c;漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞(plasmacytoid den-dritic cells,p DCs),由骨髓中的淋巴樣祖細(xì)胞分化而來(lái),主要表達(dá)CD4、CD123和CD68等

【參考文獻(xiàn)】

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2 吳健,徐軍,鐘南山;結(jié)核分支桿菌抗原85B DNA疫苗轉(zhuǎn)染人氣道上皮細(xì)胞對(duì)哮喘患者Th1/Th2平衡的調(diào)節(jié)作用[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2003年08期

【共引文獻(xiàn)】

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2 廖娟紅;林祥梅;賈廣樂(lè);;小鼠髓源未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2013年07期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 方航榮;hIL-10基因修飾樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)大鼠肝移植免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

5 李雪;IL-10基因修飾的樹(shù)突狀細(xì)胞在大鼠角膜移植中的作用[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2012年

6 余曉洋;甲氨蝶呤聯(lián)合環(huán)磷酰胺對(duì)OVA致敏小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞調(diào)控Th17/Treg免疫平衡作用的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):984495

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