Ag85B調(diào)節(jié)小鼠髓樣樹突狀細胞的成熟和TSLP介導(dǎo)下TSLPR和OX40L的表達
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【摘要】:目的:研究抗原85B(Ag85B)體外誘導(dǎo)小鼠未成熟的髓樣樹突狀細胞(m DCs)的成熟以及對胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)介導(dǎo)下m DCs表達TSLP受體(TSLPR)和OX40L的影響,探究Ag85B抑制哮喘氣道炎癥的可能機制。方法:應(yīng)用重組小鼠GM-CSF和IL-4體外誘生C57BL/6小鼠未成熟的m DCs,并運用免疫磁珠分離的方法純化,采用光鏡和掃描電鏡、流式細胞術(shù)進行形態(tài)學(xué)觀察和細胞表型鑒定;分別用0、50、100、200μg/L不同濃度的Ag85B或TSLP作用于純化并鑒定后的m DCs,培養(yǎng)24 h,流式細胞術(shù)檢測細胞表面分子CD80、CD86、TSLPR和OX40L的表達,選取最佳的Ag85B或TSLP處理濃度。隨后將m DCs隨機分為空白對照組、Ag85B處理組、TSLP處理組和Ag85B+TSLP處理組,培養(yǎng)24 h后檢測m DCs的促炎表面分子TSLPR和OX40L的表達。結(jié)果:體外誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d,倒置相差顯微鏡下可見細胞表面呈現(xiàn)不規(guī)則樹突樣突起,掃描電鏡下見細胞類圓形,表面有少量皺褶和較少分叉的樹突狀突起,符合未成熟m DCs的形態(tài)學(xué)特點;純化后的m DCs表達表面分子CD11c的細胞較表達共刺激分子CD80和CD86的細胞多,符合未成熟m DCs的表型特征。與空白對照組比較,50~200μg/L的Ag85B處理組m DCs表達CD80和CD86的細胞比率顯著增高(P0.05),表達TSLPR和OX40L的細胞比率無顯著差異。與空白對照組相比較,50、100和200μg/L濃度的TSLP處理組的m DCs表達CD80和CD86的細胞比率均顯著增加(P0.05);與空白對照組和50μg/L TSLP處理組相比較,100μg/L和200μg/L TSLP處理組的m DCs表達TSLPR和OX40L的細胞比率均顯著升高(P0.05)。選取200μg/L作為Ag85B和TSLP的優(yōu)化作用濃度,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ag85B處理組和Ag85B+TSLP處理組的m DCs表達TSLPR和OX40L的細胞比率較TSLP處理組均顯著降低(P0.05),與空白對照組比較差異不顯著。結(jié)論:Ag85B可通過上調(diào)m DCs表達共刺激分子CD80和CD86促進其成熟,同時下調(diào)TSLP介導(dǎo)的m DCs表達促炎表面分子TSLPR和OX40L,推測Ag85B可能通過TSLP介導(dǎo)的m DCs途徑抑制氣道炎癥。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)研究生院;廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 廣東省老年醫(yī)學(xué)研究所呼吸內(nèi)科;廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 廣東省老年醫(yī)學(xué)研究所醫(yī)學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】: 抗原B 胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素 髓樣樹突狀細胞 胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素受體 OXL
【基金】:廣州市科技計劃項目(No.2014J4100040) 廣東省自然科學(xué)基金資助項目(No.S2011010003664) 廣州市健康醫(yī)療協(xié)同創(chuàng)新重大專項基金(No.201400000002) 廣東省科技計劃項目(No.2013B031800026)
【分類號】:R562.25
【正文快照】: 樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)分為兩類:髓樣樹突狀細胞(myeloid dendritic cells,m DCs),由骨髓中的髓樣前體細胞分化而來,表達特異性的標記物CD11c;漿細胞樣樹突狀細胞(plasmacytoid den-dritic cells,p DCs),由骨髓中的淋巴樣祖細胞分化而來,主要表達CD4、CD123和CD68等
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,本文編號:984495
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