本文關(guān)鍵詞：機(jī)械牽張預(yù)處理對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞損傷的影響及相關(guān)機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 機(jī)械牽張 細(xì)胞骨架 F-actin 上皮屏障 細(xì)胞凋亡

【摘要】：第一部分過度機(jī)械牽張對(duì)肺泡上皮細(xì)胞凋亡及細(xì)胞骨架的影響 目的：探討過度機(jī)械牽張對(duì)肺泡上皮細(xì)胞凋亡及細(xì)胞骨架的影響,闡明其相關(guān)機(jī)制。 方法：A549細(xì)胞株培養(yǎng)鑒定后分組,每組5份,施以相應(yīng)的處理。實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組(C組)和過度牽張組(S組),S組：予以A549細(xì)胞20%的機(jī)械牽張2h、4h、6h和8h,分別記為S2組、S4組、S6組和S8組。收集細(xì)胞并測(cè)定下列指標(biāo)：流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡；熒光顯微鏡下觀察F-actin改變；RT-PCR測(cè)定RhoA和RacmRNA表達(dá)。 結(jié)果：與C組比較,S組隨牽張時(shí)間延長(zhǎng)凋亡率增加(P0.05)。F-actin染色結(jié)果顯示：與C組比較,隨著過度牽張時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)胞骨架破壞加重,S8組尤為明顯。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：與C組比較,Rac mRNA表達(dá)進(jìn)行性降低(P0.01); RhoA mRNA表達(dá)在6h、8h升高,6h時(shí)達(dá)峰值。 結(jié)論：隨著過度牽張時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞凋亡增加,細(xì)胞骨架破壞明顯,其機(jī)制可能與上調(diào)RhoA mRNA表達(dá)、抑制Rac mRNA表達(dá)密切相關(guān)。 第二部分機(jī)械牽張預(yù)處理對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞損傷的影響及相關(guān)機(jī)制的研究 目的：探討機(jī)械牽張預(yù)處理對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞凋亡及細(xì)胞骨架的影響,闡明其可能的相關(guān)機(jī)制。 方法：A549細(xì)胞株培養(yǎng)鑒定后分組,每組5份,施以相應(yīng)的處理。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(C組)、過度牽張6h組(S6組)和預(yù)牽張組(P-S組),S6組：予以上皮細(xì)胞20%的機(jī)械牽張6h,記為S6組；P-S組：預(yù)先給予5%機(jī)械牽張15min、30min、60min、120min之后將牽張幅度調(diào)整為20%牽張6h,記為P15-S6組、P30-S6組、P60-S6組和P120-S6組。所有組別均行流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡；熒光顯微鏡下觀察F-actin改變；RT-PCR測(cè)定RhoA和Rac mRNA表達(dá)。 結(jié)果：與S6組比較,預(yù)處理30、60、120min時(shí)P-S6組細(xì)胞凋亡率下降(P0.05),預(yù)牽張60min時(shí)細(xì)胞凋亡率最低。F-actin染色結(jié)果顯示：與S6組比較,P-S6組肌絲重排、斷裂減輕,周邊肌動(dòng)蛋白絲帶清晰,以預(yù)牽張60min時(shí)更優(yōu)。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：與S6組比較,P-S6組RhoA mRNA表達(dá)均明顯下降(P0.01)；Rac-1mRNA表達(dá)僅在預(yù)處理30、60min時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論：給予5%機(jī)械牽張預(yù)處理可通過抑制RhoA mRNA表達(dá)而上調(diào)Rac-1mRNA表達(dá),從而減輕20%過度牽張所致的肺泡上皮細(xì)胞凋亡及細(xì)胞骨架破壞。
【關(guān)鍵詞】：機(jī)械牽張 細(xì)胞骨架 F-actin 上皮屏障 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R563.8
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 主要英文縮略詞表10-11
• 前言11-15
• 第一部分 過度機(jī)械牽張對(duì)肺泡上皮細(xì)胞細(xì)胞損傷的影響15-29
• 材料和方法15-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備16-17
• 1.3 細(xì)胞培養(yǎng)17
• 1.4 機(jī)械牽張17
• 1.5 實(shí)驗(yàn)分組17-18
• 1.6 檢測(cè)項(xiàng)目與方法18-21
• 1.7 統(tǒng)計(jì)分析21-22
• 結(jié)果22-27
• 1.1 過度牽張對(duì)肺泡上皮細(xì)胞細(xì)胞凋亡的影響22
• 1.2 過度牽張對(duì)肺泡上皮細(xì)胞肌動(dòng)蛋白(F-ACTIN)的影響22
• 1.3 過度牽張對(duì)肺泡上皮細(xì)胞RHOA和RAC-1 MRNA表達(dá)影響22-27
• 討論27-29
• 第二部分 機(jī)械牽張預(yù)處理對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞損傷的影響及相關(guān)機(jī)制研究29-43
• 材料和方法29-36
• 1.1 實(shí)驗(yàn)試劑29-30
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備30-31
• 1.3 細(xì)胞培養(yǎng)31
• 1.4 機(jī)械牽張31
• 1.5 實(shí)驗(yàn)分組31-32
• 1.6 檢測(cè)項(xiàng)目與方法32-35
• 1.7 統(tǒng)計(jì)分析35-36
• 結(jié)果36-41
• 1.1 預(yù)牽張對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響36
• 1.2 預(yù)牽張對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞肌動(dòng)蛋白(F-ACTIN)的影響36
• 1.3 預(yù)牽張對(duì)過度牽張所致肺泡上皮細(xì)胞RHOA和RAC MRNA表達(dá)的影響36-41
• 討論41-43
• 第三部分 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 攻讀學(xué)位期間主要的研究成果58-59
• 附件59-65
• 致謝65

【共引文獻(xiàn)】

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6 董sビ，

本文編號(hào)：936963