本文關(guān)鍵詞：全氟化碳對肺間充質(zhì)干細(xì)胞體外相關(guān)生物學(xué)特性的影響

  更多相關(guān)文章： 肺間充質(zhì)干細(xì)胞 全氟化碳 增殖 分化 旁分泌

【摘要】：目的：肺間充質(zhì)干細(xì)胞為肺間充質(zhì)來源的內(nèi)源性成體干細(xì)胞,能夠自我復(fù)制并分化成肺組織中的各種間充質(zhì)及非間充質(zhì)細(xì)胞,參與肺損傷的修復(fù)過程,是急性肺損傷及各種肺部疾病治療的潛在靶點(diǎn)。全氟化碳為肺液體通氣治療的主要介質(zhì),具有高攜氧性及生物抗炎效應(yīng),但其治療急性肺損傷的機(jī)制仍不明確,本研究擬從全氟化碳對肺間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響方面探討全氟化碳治療急性肺損傷的作用機(jī)制。方法：(1)采用膠原蛋白酶消化法從大鼠肺臟中提取LMSC,并對所提取細(xì)胞的表面標(biāo)志抗原及體外誘導(dǎo)分化能力進(jìn)行鑒定。(2)將細(xì)胞分為LMSC組和PFC處理組,分別繪制兩組生長曲線并檢測細(xì)胞周期以觀察PFC對LMSC體外生長增殖的影響。(3)將細(xì)胞分為對照組、SAGM誘導(dǎo)分化組和SAGM+PFC組,誘導(dǎo)LMSC向肺上皮細(xì)胞分化,分別采用RT-qPCR及免疫熒光檢測SPC和AQP5的mRNA和蛋白表達(dá),觀察PFC對LMSC向肺泡上皮分化能力的影響。(4)將細(xì)胞分為對照組、LPS(200ng/ml)組、PFC組以及LPS(200ng/ml)+PFC組,分別干預(yù)24h后,采用RT-qPCR檢測細(xì)胞IL-1ra、KGF、VEGF、HGF、TSG-6、ANG-1和TGF-β的mRNA表達(dá),采用ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HGF的分泌量,以觀察PFC對LMSC旁分泌能力的影響。結(jié)果：(1)從大鼠肺臟組織中提取的細(xì)胞體外培養(yǎng)貼壁,免疫表型為CD29+/CD54+/CD90+/CD45-/CD11b-/CD31-,能夠誘導(dǎo)向成脂、成骨和成軟骨方向分化,可以鑒定為LMSC。(2) LMSC的生長曲線及細(xì)胞周期檢測均符合干細(xì)胞特點(diǎn),PFG組生長曲線及細(xì)胞周期均較LMSC組無明顯差異。(3)誘導(dǎo)分化組及PFC組均可見SPC和AQP5表達(dá),對照組免疫熒光基本無SPC和AOP5表達(dá)。前兩組SPC和AQP5的平均光密度值及mRNA相對表達(dá)量均顯著高于對照組(P0.01)。誘導(dǎo)分化組SPC平均光密度值及mRNA相對表達(dá)量均高于PFC組(P0.05),但兩組之間AQP5的平均光密度值及mRNA相對表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(4)LPS組IL-1ra、KGF、VEGF和TSG-6 mRNA表達(dá)高于對照組(p0.05)。LPS+PFC組IL-1ra、KGF及VEGF mRNA表達(dá)高于LPS組(p0.05)。細(xì)胞培養(yǎng)上清中LPS組HGF含量明顯高于對照組(p0.01),LPS+PFC組則高于LPS組(p0.05)。PFC組和對照組之間所有旁分泌因子表達(dá)均無差異。結(jié)論：(1)利用膠原酶消化法能成功提取LMSC。(2)PFC不影響LMSC體外生長增殖。 (3)PFC抑制LMSC向Ⅱ型上皮細(xì)胞分化,不影響LMSC向Ⅰ型上皮細(xì)胞分化。(4)LPS能刺激LMSC分泌IL-1ra、KGF、VEGF、HGF和TSG。PFC能促進(jìn)受LPS刺激的LMSC分泌IL-1ra、KGF、VEGF及HGF,對未受LPS刺激的LMSC則無促進(jìn)作用。
【關(guān)鍵詞】：肺間充質(zhì)干細(xì)胞 全氟化碳 增殖 分化 旁分泌
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R56
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 前言11-14
• 第一部分 LMSC的分離培養(yǎng)與鑒定14-24
• 材料與方法14-19
• 結(jié)果19-21
• 討論21-24
• 第二部分 PFC對LMSC體外生物學(xué)特性的影響24-47
• 第一節(jié) PFC對LMSC生長增殖的影響24-28
• 材料與方法24-25
• 結(jié)果25-27
• 討論27-28
• 第二節(jié) PFC對LMSC分化能力的影響28-38
• 材料與方法28-33
• 結(jié)果33-37
• 討論37-38
• 第三節(jié) PFC對LMSC旁分泌能力的影響38-47
• 材料與方法38-41
• 結(jié)果41-45
• 討論45-47
• 全文結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-56
• 文獻(xiàn)綜述56-64
• 參考文獻(xiàn)59-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況64-65
• 致謝65

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳曉路;陳蘋;賈竹青;劉羿男;馬康濤;張永珍;周春燕;;人類胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的白細(xì)胞抗原表達(dá)特征[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年06期

2 褚曉倩;王麗;Paulina Duya;邊育紅;;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在細(xì)胞治療中的應(yīng)用潛能[J];長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2012年03期

3 白海;司志剛;王存邦;薛智文;吳濤;楊小亮;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對異體外周血T淋巴細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年17期

4 張清軍;高毅;潘明新;姚坤厚;汪艷;;同期輸注供者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對肝移植大鼠免疫的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2007年09期

5 饒龍華;李濟(jì)宇;;間充質(zhì)干細(xì)胞用于肝臟移植的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2010年07期

6 洪再發(fā);黃小進(jìn);尹震宇;王效民;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)肝移植術(shù)后免疫耐受的研究[J];肝膽外科雜志;2008年05期

7 裘影影;李晶;;間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用與系統(tǒng)性紅斑狼瘡[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2006年09期

8 朱震;沈振亞;陳海軍;;MSCs修飾受體胸腺對異種心臟移植免疫排斥反應(yīng)的作用研究[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2012年21期

9 吳卓;趙文婧;劉玲瓏;吳麗情;陳維平;;骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞三維微環(huán)境復(fù)合培養(yǎng)體系的構(gòu)建[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

10 陳京;季明芳;李曉玲;方慧云;余元龍;程偉民;;臨床治療用人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞保存條件的研究[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2014年12期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Qinjun Zhao;Hongying Ren;Zhongchao Han;;Mesenchymal stem cells: Immunomodulatory capability and clinical potential in immune diseases[A];第十四屆全國腫瘤生物治療大會(huì)論文集[C];2015年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 譚舟;MK和GM-CSFRα在胚胎干細(xì)胞中的表達(dá)與功能研究[D];浙江大學(xué);2010年

2 梁新悅;低劑量輻射誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)及機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2011年

3 鎮(zhèn)海文;LPS調(diào)節(jié)TLR4介導(dǎo)促進(jìn)心肌細(xì)胞存活時(shí)間的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

4 于靚霞;間充質(zhì)干細(xì)胞輸注治療重癥肌無力的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

5 孫軍;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞抗炎免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

6 杜世偉;不同途徑移植人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠腦缺血卒中的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

7 余鵬程;供者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對大鼠腎移植慢性排斥的作用及其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

8 趙恩德;人記憶性T細(xì)胞的調(diào)控及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在骨髓微環(huán)境中作用的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

9 解琳娜;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞免疫學(xué)特性及其對急性移植物抗宿主病的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

10 呂璐璐;人臍帶來源間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究及其對移植物抗宿主病作用的初步探討[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 袁文佶;人胎盤間充質(zhì)樣干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及其生物學(xué)特性分析[D];浙江大學(xué);2011年

2 郭俊賢;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化的臨床觀察[D];河南大學(xué);2011年

3 任海燕;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對再生障礙性貧血患者造血負(fù)調(diào)控因子的調(diào)節(jié)作用[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

4 張睿婷;人臍帶與胎盤來源的間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及免疫調(diào)節(jié)作用的比較[D];暨南大學(xué);2011年

5 高婧;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對百草枯所致急性肺損傷治療的研究[D];蘭州大學(xué);2011年

6 韓夏;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞血紅素加氧酶-1過表達(dá)對其IL-10分泌影響研究[D];蘭州大學(xué);2011年

7 李長珠;骨髓來源細(xì)胞參與肝臟損傷后修復(fù)的作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

8 李保環(huán);臍血干細(xì)胞移植術(shù)在潰瘍性結(jié)腸炎治療中的臨床應(yīng)用[D];山東大學(xué);2011年

9 李煜環(huán);骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對1型糖尿病大鼠淋巴細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

10 王小博;人類臍帶血MSC和骨髓MSC分泌細(xì)胞因子的對比研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2011年

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本文編號：925860