本文關(guān)鍵詞：C-8神經(jīng)酰胺對(duì)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞通透性及緊密連接蛋白的影響

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【摘要】：目的研究外源性C-8神經(jīng)酰胺對(duì)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(AECⅡ)單層通透性的影響,探討其作用機(jī)制。方法將體外分離培養(yǎng)的AECⅡ通過差速貼壁法純化,在Transwell上構(gòu)建單層,待細(xì)胞融合后給予不同濃度的C-8神經(jīng)酰胺(0、25、50、100μmol/L)繼續(xù)培養(yǎng)24 h,應(yīng)用伏歐計(jì)測(cè)定跨上皮電阻值(TEER)及辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記法檢測(cè)吸光度(OD)值;分別提取細(xì)胞總蛋白及總RNA,采用Western blot和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法檢測(cè)不同濃度的C-8神經(jīng)酰胺對(duì)AECⅡ緊密連接蛋白ZO-1和Occludin蛋白水平和mRNA水平表達(dá)的影響。結(jié)果不同濃度的C-8神經(jīng)酰胺刺激融合的AECⅡ單層24 h后,各組間TEER值、OD值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=38.780、19.780,P0.001)。C-8神經(jīng)酰胺作用后,ZO-1、Occludin蛋白(F=71.150,P0.01;F=7.703,P=0.002)及mRNA(F=4.887,P=0.014;F=3.637,P=0.048)表達(dá)量明顯降低。結(jié)論 C-8神經(jīng)酰胺可能通過下調(diào)緊密連接蛋白的表達(dá)增加肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞通透性。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 神經(jīng)酰胺 緊密連接 肺上皮細(xì)胞 跨上皮電阻
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號(hào):81400058) 安徽省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):1208085QH165)
【分類號(hào)】：R563.8
【正文快照】： 2015-11-23接收急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distresssyndrome,ARDS)最顯著的病理學(xué)變化是彌漫性肺泡上皮細(xì)胞損傷,包括肺泡上皮屏障、肺泡水清除、肺泡表面活性物質(zhì)的分泌等[1]。其中肺泡上皮屏障損傷是ARDS發(fā)病環(huán)節(jié)中的重要一步,而肺泡上皮屏障發(fā)揮選擇性通透作用

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本文編號(hào)：906035