發(fā)布時(shí)間：2017-09-21 20:38

  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)毒素對(duì)香煙煙霧暴露大鼠肺ICAM-1、IL-6、IL-10表達(dá)的影響

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【摘要】：背景當(dāng)前我國吸煙人數(shù)居高不下,每年因吸煙相關(guān)疾病死亡的人數(shù)正在逐年上升。在吸煙對(duì)人體的危害中,呼吸系統(tǒng)首當(dāng)其沖,香煙煙霧的長期慢性刺激可以使支氣管和肺產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。此外,革蘭氏陰性桿菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素(endotoxin, ETx)即脂多糖(lipopolysaccharide, LP S)侵入肺臟也可以誘發(fā)肺部炎癥,在肺部感染和膿毒血癥中發(fā)揮重要作用。長期吸煙的人如果發(fā)生感染會(huì)使原本已經(jīng)存在的肺部炎癥進(jìn)一步加重,向慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)發(fā)展,甚至可致急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)和多器官功能障礙。目的探討內(nèi)毒素對(duì)香煙煙霧暴露大鼠肺ICAM-1 (inflammatory cell adhesion molecules-1, ICAM-1)、IL-6 (interleukin-6, IL-6)、IL-10 (interleukin-10, IL-10)表達(dá)的影響。方法40只健康SD大鼠,隨機(jī)分為4組：內(nèi)毒素組、煙霧組、對(duì)照組、空白組,每組10只。內(nèi)毒素組持續(xù)進(jìn)行香煙煙霧暴露28天,并在第1天和第14天以1mg·Kg-1的劑量氣管內(nèi)滴注LPS。煙霧組只進(jìn)行28天香煙煙霧暴露,其余操作同內(nèi)毒素組。對(duì)照組在第1天和第14天氣管內(nèi)滴注等量的生理鹽水替代LPS,其余操作同內(nèi)毒素組�？瞻捉M大鼠正常飼養(yǎng),不進(jìn)行任何處理。28天后用4%水合氯醛以10ml·Kg-1的劑量對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔注射麻醉,行頸總動(dòng)脈插管術(shù),暴露膈肌并與BL-420生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)相連,穩(wěn)定10min后,記錄呼吸曲線,然后抽取動(dòng)脈血5m1用全自動(dòng)血?dú)夥治鰞x檢測(cè)動(dòng)脈血氧分壓(arterial partial pressure of oxygen, PaO2)口動(dòng)脈血二氧化碳分壓(arterial partial pressure of carbondioxide, PaCO2),實(shí)驗(yàn)結(jié)束將動(dòng)物處死后取出肺組織,分成四份。一份用HE染色觀察4組大鼠肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu),一份用免疫組化SP法觀察4組大鼠肺組織ICAM-1、IL-6和IL-10蛋白的表達(dá),一份制成肺組織勻漿,用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)檢測(cè)4組大鼠肺組織中ICAM-1、IL-6和IL-10三種蛋白的含量,一份用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測(cè)4組大鼠肺組織勻漿中ICAM-1、IL-6和IL-10mRNA水平。上述結(jié)果運(yùn)用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果①呼吸曲線參數(shù)結(jié)果顯示：內(nèi)毒素組吸氣、呼氣持續(xù)時(shí)間和呼吸幅度低于煙霧組,煙霧組低于空白組(P0.05)；內(nèi)毒素組呼吸頻率高于煙霧組,煙霧組高于空白組(P0.05)。煙霧組大鼠吸氣、呼氣持續(xù)時(shí)間、呼吸幅度、呼吸頻率等各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。②血?dú)庵笜?biāo)結(jié)果顯示：內(nèi)毒素組Pa02低于煙霧組,煙霧組低于空白組(P0.05)；內(nèi)毒素組PaCO2高于煙霧組,煙霧組高于空白組(P0.05)。煙霧組大鼠PaO2、PaCO2與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)③HE染色結(jié)果顯示：內(nèi)毒素組大鼠支氣管與肺泡呈現(xiàn)較嚴(yán)重的炎癥病理改變,煙霧組與對(duì)照組也表現(xiàn)出與內(nèi)毒素組相似的病理變化,但程度較輕,空白組大鼠無上述表現(xiàn),支氣管、肺泡結(jié)構(gòu)正常。④免疫組化結(jié)果顯示：內(nèi)毒素組大鼠肺組織細(xì)胞中ICAM-1、IL-6蛋白水平高于煙霧組,煙霧組高于空白組(P0.05)；內(nèi)毒素組大鼠肺組織細(xì)胞中IL-10蛋白水平低于煙霧組,煙霧組低于空白組(P0.05)。煙霧組和對(duì)照組的ICAM-1、IL-6、IL-10蛋白水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。⑤ELISA結(jié)果顯示：內(nèi)毒素組大鼠肺組織細(xì)胞中ICAM-1、IL-6蛋白含量高于煙霧組,煙霧組高于空白組(P0.05)；內(nèi)毒素組大鼠肺組織細(xì)胞中IL-10蛋白含量低于煙霧組,煙霧組低于空白組(P0.05)；煙霧組的ICAM-1蛋白、IL-6蛋白和1L-10蛋白含量和對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。⑥RT-PCR結(jié)果顯示：內(nèi)毒素組大鼠肺組織細(xì)胞中ICAM-1、IL-6 mRNA水平高于煙霧組,煙霧組高于空白組(P0.05)；內(nèi)毒素組大鼠肺組織細(xì)胞中IL-10 mRNA水平低于煙霧組,煙霧組低于空白組(P0.05)；煙霧組的ICAM-1、IL-6和IL-10 mRNA表達(dá)水平和對(duì)照組相比無差異(P0.05)。上述結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。結(jié)論內(nèi)毒素作用下的香煙煙霧暴露大鼠肺部炎癥損傷進(jìn)一步加重,呼吸功能進(jìn)一步降低,其機(jī)制可能與肺組織ICAM-1、IL-6表達(dá)增多、IL-10表達(dá)減少引起的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)失衡密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)毒素 香煙煙霧 細(xì)胞粘附分子-1 白細(xì)胞介素-6 白細(xì)胞介素-10
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R563
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 1 材料和方法11-20
• 2 結(jié)果20-23
• 3 討論23-28
• 小結(jié)28-29
• 附圖29-37
• 附表37-39
• 參考文獻(xiàn)39-45
• 綜述：細(xì)胞粘附分子-1的研究進(jìn)展45-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 附錄59-60
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況60-61
• 致謝61-62
• 個(gè)人簡歷62

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊一新;李桂源;;LPS所介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進(jìn)展[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年01期

2 李洪霞,張進(jìn)川,趙亞力,郝好杰;白細(xì)胞介素-10對(duì)急性肺損傷炎癥/抗炎介質(zhì)表達(dá)的影響[J];中國危重病急救醫(yī)學(xué);2005年06期

3 李金麗;翟心慧;;整合素LFA-1與其配體ICAM-1的生理功能及相關(guān)疾病[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2013年08期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王擁軍;ICAM-1在COPD樣大鼠肺損傷中的作用[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2014年

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本文編號(hào)：896750