發(fā)布時間：2017-09-19 21:33

  本文關(guān)鍵詞：DANCE作為體內(nèi)外細胞的病理反應(yīng)及其機制的研究

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【摘要】：目的:我們的前期研究發(fā)現(xiàn),DANCE(Density Alteration in Non-physiological Cells)反應(yīng)是一種普遍存在的生命現(xiàn)象,包括體外培養(yǎng)的人細胞株、小鼠體內(nèi)組織細胞、大腸桿菌和白色念珠菌等;本研究以體外培養(yǎng)的細胞/細菌和腎上腺素誘導(dǎo)的小鼠急性肺水腫模型為實驗對象,研究病理條件下體內(nèi)外細胞/細菌發(fā)生的DANCE反應(yīng)及其機制。方法:通過改變體外培養(yǎng)的細胞/細菌的培養(yǎng)條件以及應(yīng)用藥物干預(yù)方法,測定細胞/細菌的體外DANCE反應(yīng);分別收集正常昆明小鼠的肝臟和肺組織各細胞條帶進行HE染色,鏡下觀察各條帶的組分及其組織細胞的形態(tài)變化;測定小鼠肝臟和肺組織細胞的DANCE反應(yīng);測定小鼠的肺濕重/肺干重比值;制備小鼠肺組織病理切片;應(yīng)用蒽酮法測定小鼠肝糖原含量;應(yīng)用Quantitative Real-time PCR測定腎上腺素不同劑量和不同作用時間對小鼠肝臟細胞IL-1β和IL-6的m RNA表達水平的影響;分析各實驗結(jié)果與小鼠肝臟和肺組織細胞DANCE反應(yīng)的關(guān)系。結(jié)果:正常培養(yǎng)的細胞/細菌經(jīng)DSGC離心后,均可分離出具有不同密度的細胞條帶;在培養(yǎng)條件改變和藥物的作用下,細胞條帶的數(shù)目或含量都會發(fā)生改變;正常昆明小鼠經(jīng)HE染色,鏡下可見肺和肝臟的組織勻漿各DSGC分離條帶主要由細胞團和組織碎片組成;小鼠肝臟和肺細胞發(fā)生DANCE-DOWN反應(yīng),且這種DANCE反應(yīng)對腎上腺素的給藥劑量和作用時間具有明顯的依賴性;肺的DANCE反應(yīng)概率在給藥2小時和6小時出現(xiàn)兩個高峰,而肝臟則在1小時和8小時出現(xiàn)兩個高峰;小鼠肺組織細胞的DANCE反應(yīng)概率和肺濕重/肺干重比值之間具有明顯的相關(guān)性;肺組織細胞發(fā)生DANCE反應(yīng)的小鼠,鏡下可見其肺組織切片中有明顯的血細胞積聚現(xiàn)象;急性肺水腫小鼠肝糖原含量在給藥1小時出現(xiàn)一個低谷,但在8小時出現(xiàn)一個高峰;肝臟細胞中IL-1β和IL-6的m RNA相對表達量與肝臟組織細胞的DANCE反應(yīng)概率具有明顯的相關(guān)性,在注射腎上腺素1小時后達到高峰。結(jié)論:體外細胞和細菌/真菌在培養(yǎng)條件改變或藥物作用下可發(fā)生DANCE反應(yīng),是細胞和細菌/真菌發(fā)生病理生理變化的一種反映;腎上腺素所致急性肺水腫可引起小鼠肝和肺組織細胞的DANCE反應(yīng),其反應(yīng)概率與藥物劑量和作用時間有關(guān),且伴有肝臟細胞IL-1β和IL-6的m RNA水平升高,因此,肝和肺組織細胞的這種DANCE改變是機體對腎上腺素所致急性肺水腫的一種病理反應(yīng)。由腎上腺素引起的,細胞因子介導(dǎo)的體內(nèi)應(yīng)激性炎癥性反應(yīng)、肝臟細胞代謝(如糖原代謝)模式改變、肺內(nèi)壓過高造成肺組織細胞受擠壓、肺循環(huán)異常造成肺組織“淤血”等病理變化,可能是導(dǎo)致這種體內(nèi)DANCE反應(yīng)的機制。
【關(guān)鍵詞】：DANCE 急性肺水腫 腎上腺素 DSGC
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 緒論9-15
• 第一章 實驗材料與方法15-33
• 1.1 實驗材料15-19
• 1.1.1 實驗細胞、細菌與真菌15
• 1.1.2 實驗動物15
• 1.1.3 試劑及耗材15-17
• 1.1.4 實驗儀器17-18
• 1.1.5 試劑配制18-19
• 1.1.6 引物序列19
• 1.2 實驗方法19-33
• 1.2.1 K562 細胞的DANCE反應(yīng)19-21
• 1.2.2 E.coli BL21 DANCE的DSGC實驗21-22
• 1.2.3 ATCC10231 的DSGC實驗22-24
• 1.2.4 急性肺水腫小鼠的DANCE反應(yīng)研究24-28
• 1.2.5 小鼠肺濕重/肺干重比值的測定28
• 1.2.6 小鼠肝糖原含量的測定28-29
• 1.2.7 小鼠肝臟中IL-1bate、IL-6 基因表達量的檢測29-32
• 1.2.8 統(tǒng)計學(xué)處理32-33
• 第二章 實驗結(jié)果與分析33-55
• 2.1 體外細胞和細菌實驗結(jié)果33-39
• 2.1.1 新復(fù)蘇K562 細胞在不同培養(yǎng)基和相同密度梯度條件下DANCE變化的比較分析33
• 2.1.2 老的K562 細胞在不同培養(yǎng)基和相同密度梯度條件下DANCE變化的比較分析33-34
• 2.1.3 不同血清培養(yǎng)的K562 細胞的DANCE反應(yīng)和生長曲線34-35
• 2.1.4 反式維甲酸A（VA）對不同培養(yǎng)狀態(tài)的K562 細胞DANCE反應(yīng)影響35-36
• 2.1.5 不同培養(yǎng)時間E. coli BL21 的DNACE反應(yīng)36-37
• 2.1.6 氨芐青霉素引起E. coli BL21 的DNACE反應(yīng)37
• 2.1.7 不同培養(yǎng)時間真菌ATCC10231 的DANCE反應(yīng)37-38
• 2.1.8 不同培養(yǎng)密度ATCC10231 的DANCE反應(yīng)38
• 2.1.9 酮康唑所致真菌ATCC10231 的DANCE反應(yīng)38-39
• 2.2 體內(nèi)細胞DANCE反應(yīng)實驗結(jié)果39-55
• 2.2.1 小鼠肝臟細胞與肺細胞HE染色39-42
• 2.2.2 急性肺水腫小鼠肺細胞的DANCE反應(yīng)42-43
• 2.2.3 急性肺水腫小鼠組織學(xué)評價及與DANCE反應(yīng)的關(guān)系43-44
• 2.2.4 注射腎上腺素后各組小鼠肺濕重/肺干重比值的比較分析44-45
• 2.2.5 注射腎上腺素后各組小鼠肺細胞的DANCE反應(yīng)與肺濕重/肺干重比值的關(guān)系45-47
• 2.2.6 急性肺水腫小鼠肝臟細胞的DANCE反應(yīng)47-48
• 2.2.7 注射腎上腺素后各組小鼠肝糖原含量的比較分析。48-49
• 2.2.8 注射腎上腺素后各組小鼠肝臟的DANCE反應(yīng)概率與肝糖原含量的關(guān)系49-51
• 2.2.9 注射腎上腺素后各組小鼠肝臟中IL-1β 和IL-6 的mRNA含量的比較分析51-53
• 2.2.10 注射腎上腺素后各組小鼠肝臟DANCE反應(yīng)概率與IL-1β、IL-6 mRNA含量的關(guān)系53-55
• 第三章 討論55-58
• 第四章 全文總結(jié)58-60
• 4.1 本文主要結(jié)論58
• 4.2 創(chuàng)新之處58-59
• 4.3 不足與展望59-60
• 參考文獻60-63
• 英文縮略詞（Abbreviation）63-64
• 在校期間發(fā)表論文64-65
• 致謝65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號：884046